[发明专利]一种提高双功能纤维素酶的催化效率的方法及突变体、基因和应用

摘要

本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高双功能纤维素酶的催化效率的方法及突变体、基因和应用。本发明以GH5‑5家族Bispora sp.MEY‑1来源的具有纤维素酶与甘露聚糖酶活性的双功能纤维素酶BsCel5B作为母本，发现位点Thr100对酶的双功能特性有着重要的影响。突变为Thr100Asn与Thr100Cys后，可获得纤维素酶活性提高突变体；突变为Thr100Ile、Thr100Leu、Thr100Val和Thr100Ser后，可获得的甘露聚糖酶活性提高的突变体。在此改造条件下，纤维素酶突变体对纤维素底物的比活力最高比突变前提高了150%，甘露聚糖酶比活力最多提高了81%。突变体更为优越的双功能的特性比野生型有着更为广阔的应用空间，也奠定了其在工业生产领域的应用前景。