[发明专利]一种提高双功能纤维素酶的催化效率的方法及突变体、基因和应用有效
| 申请号： | 202111585620.2 | 申请日： | 2021-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN113980940B | 公开（公告）日： | 2022-03-25 |
| 发明（设计）人： | 罗会颖;郑洁;秦星;黄火清;王亚茹;柏映国;王苑;涂涛;苏小运;张杰;王晓璐;张红莲;于会民;杨浩萌;姚斌 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 | 代理人： | 尹超群 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 功能 纤维素酶 催化 效率 方法 突变体 基因 应用 | ||
1.一种提高双功能纤维素酶对纤维素底物的催化效率的方法，其特征在于，所述方法包括将氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的野生型的双功能纤维素酶的第100位氨基酸由Thr突变为Asn，或者由Thr突变为Cys的步骤。
2.一种提高双功能纤维素酶对甘露聚糖底物的催化效率的方法，其特征在于，所述方法包括将氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的野生型的双功能纤维素酶的第100位氨基酸由Thr突变为Ile、Leu、Val或者Ser的步骤。
3.一种催化效率提高的双功能纤维素酶突变体，其特征在于，所述纤维素酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO： 3、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO： 7、SEQ ID NO： 9、SEQ ID NO： 11或SEQ ID NO. 13所示。
4.一种纤维素酶基因，其特征在于，编码权利要求3所述的催化效率提高的双功能纤维素酶突变体。
5.根据权利要求4所述的纤维素酶基因，其特征在于，所述纤维素酶基因的核苷酸序列SEQ ID NO： 4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO： 8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO： 12或SEQ ID NO.14所示。
6.含有权利要求4所述纤维素酶基因的重组表达载体。
7.含有权利要求4所述纤维素酶基因的重组细胞。
8.一种制备催化效率提高的双功能纤维素酶的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
构建包含权利要求4所述纤维素酶基因的重组表达载体；
以获得的重组表达载体转化宿主细胞；
诱导被转化的宿主细胞表达纤维素酶；
回收并纯化表达的纤维素酶。
9.权利要求3所述的催化效率提高的双功能纤维素酶突变体作为饲料添加剂的应用。
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