[发明专利]一种酶活提高的L-天冬氨酸β-脱羧酶突变体及其应用有效
申请号: | 201711354029.X | 申请日: | 2017-12-15 |
公开(公告)号: | CN108070581B | 公开(公告)日: | 2020-09-04 |
发明(设计)人: | 饶志明;汪芳;杨套伟;徐美娟;张显 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/06;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种酶活提高的L‑天冬氨酸β‑脱羧酶突变体及其应用,属于基因工程领域。本发明的突变体是在SEQIDN0.2所示的氨基酸的基础上,将第484位亮氨酸突变成甲硫氨酸。因为表达包涵体问题将构建的重组载体L484M‑pET28aN端起始密码子后一段冗余序列删除得到重组质粒L484M‑pET28a‑M。本发明得到的突变体在大肠杆菌中表达,经纯化得到的酶做酶学性质研究,pH4.5、pH5.0、pH6.5下相对酶活分别提高了40%、36%、42%。L484M和未突变酶在相同酶活不同pH条件下进行全细胞转化1h取样测定产量,在最适pH5.5条件下,产量提高48.5%。本发明表明484位氨基酸残基对酶的催化作用有较大影响,对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础,并提高了该酶的工业应用潜力。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 天冬氨酸 脱羧酶 突变体 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种L-天冬氨酸β-脱羧酶突变体,其特征在于,所述突变体的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。
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