[发明专利]一种添加Fe2+提高大肠杆菌工程菌合成5‑氨基乙酰丙酸的方法有效
| 申请号： | 201510017646.5 | 申请日： | 2015-01-13 |
| 公开（公告）号： | CN104561158B | 公开（公告）日： | 2018-01-16 |
| 发明（设计）人： | 康振;陈坚;堵国成;张俊丽 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12P13/00 | 分类号： | C12P13/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙)11419 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种添加Fe2+提高大肠杆菌工程菌合成5‑氨基乙酰丙酸的方法，属于代谢工程和微生物发酵领域。本发明以已构建的合成5‑氨基乙酰丙酸的大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)LADF‑6为出发菌株，考察培养基中添加Fe2+对ALA合成的影响，通过发酵验证，目的产物ALA产量有明显提高，30h时ALA产量为2.25g/L。在此基础上，经过优化Fe2+的初始添加量并在3L发酵罐中放大培养，当添加10mg/L的Fe2+时，ALA产量为3.85g/L。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 添加 fe2 提高 大肠杆菌 工程 合成 氨基 乙酰 丙酸 方法 | ||
【主权项】：
一种提高大肠杆菌工程菌株产5‑氨基乙酰丙酸的方法，其特征在于，控制发酵培养基中Fe2+的初始浓度为0.0036‑0.036mMol/L；所述大肠杆菌工程菌株是以大肠杆菌为宿主，使用不同拷贝数的表达载体过量表达谷氨酰‑tRNA还原酶、谷氨醛氨基转移酶、尿卟啉原III合酶和粪卟啉原III氧化酶；以pRSFDuet‑1表达hemA、hemL、hemF，以pETDuet‑1表达hemD，将两个质粒转入大肠杆菌得到大肠杆菌工程菌株。
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