[发明专利]一种添加Fe2+提高大肠杆菌工程菌合成5‑氨基乙酰丙酸的方法

权利要求书

1.一种提高大肠杆菌工程菌株产5-氨基乙酰丙酸的方法，其特征在于，控制发酵培养基中Fe²⁺的初始浓度为0.0036-0.036mMol/L；所述大肠杆菌工程菌株是以大肠杆菌为宿主，使用不同拷贝数的表达载体过量表达谷氨酰-tRNA还原酶、谷氨醛氨基转移酶、尿卟啉原III合酶和粪卟啉原III氧化酶；以pRSFDuet-1表达hemA、hemL、hemF，以pETDuet-1表达hemD，将两个质粒转入大肠杆菌得到大肠杆菌工程菌株。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述大肠杆菌是E.coli BL21(DE3)。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在发酵起始阶段向本身不含亚铁离子的培养基中添加1.0-10mg/L FeSO₄·7H₂O。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将重组菌活化后以2-5％接种量转接发酵培养基中发酵，0h时添加0.1-0.5mM IPTG诱导基因表达，添加1.0-10mg/L FeSO₄·7H₂O，氨苄青霉素和卡那霉素，30-37℃，200r/min培养，周期28-36h。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵培养基按g/L计含：(NH₄)₂SO₄ 10-15，KH₂PO₄ 4.5-5.0，Na₂HPO₄·12H₂O 12-15，MgSO₄·7H₂O 0.8-1.0，酵母提取物0.8-1.0，葡萄糖15-20，pH 7.0。