[发明专利]一种提高L-异亮氨酸发酵产酸的方法

说明书

本发明属于氨基酸生产技术领域，公开了一种提高L‑异亮氨酸发酵产酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：将黄色短杆菌种子液以5‑10%接种量接种到发酵培养基中，控制发酵温度27‑32℃，发酵至64h停止，得到L‑异亮氨酸发酵液。本发明提高了L‑异亮氨酸发酵产率，降低了发酵成本。

技术领域

本发明属于氨基酸发酵领域，具体涉及一种提高L-异亮氨酸发酵产酸的方法。

背景技术

异亮氨酸（Isoleucine，Ile），又称“异白氨酸”，系统命名为“α-氨基-β-甲基戊酸”，化学式C₆H₁₃NO₂，属脂肪族中性氨基酸的一种。是人与动物自身不能合成而必须依赖外源供给的八种必须氨基酸之一，具有多种生理功能，被广泛应用于医药、食品、饲料和化妆品等领域。特别是在医药领域，异亮氨酸可用于与其他必需氨基酸配制成复合氨基酸输液，尤其是高支链氨基酸输液及口服液，不仅可以提高人体免疫力，还能促进病人康复及手术后复原。此外，其还应用于血脑屏障、肝昏迷、慢性肝硬化及肾功能衰竭的治疗，先天性代谢缺陷病的膳食治疗，败血症及术后糖尿病患者的治疗，肿瘤患者的营养支持治疗等。

L-异亮氨酸生产方法主要有化学合成法、提取法和发酵法，其中，提取法和化学合成法由于存在原料来源受限制、生产成本高、污染环境等缺陷而难以实现工业化生产。微生物发酵法具有原料成本低、反应条件温和、容易实现大规模生产等优点。微生物发酵法生产L-异亮氨酸包括微生物转化和直接发酵两种方式，其中前者使用葡萄糖作为碳源，在添加特异性前体的基础上通过微生物作用将其转化为异亮氨酸，而后者是借助微生物具有合成自身所需氨基酸的能力，通过选育营养缺陷型突变株以解除代谢调节中的反馈抑制和反馈阻遏作用，从而达到积累异亮氨酸的目的。

随着对L-异亮氨酸发酵法的深入研究，微生物发酵法已成为生产L-异亮氨酸最主要的方法，发酵水平的高低是决定产品成本的主要因素。但是，现有的L-异亮氨酸发酵法仍存在产酸率低、糖酸转化率低的问题。因此，筛选一株适合工业化生产、性能稳定的优良高产菌株，同时匹配该菌株的最佳发酵工艺条件和控制手段是至关重要的。

中国专利CN112725391A，采用新疆阜丰生物科技有限公司菌种研究室保存的菌种作为出发菌株；将原始出发菌种通过活化、稀释，涂在适合细菌生长的培养基上；经分离后即为各种纯种菌株；采用亚硝基胍进行诱变处理，再进行筛选培养，获得一株能够高效利用甘油、L-异亮氨酸产率高的黄色短杆菌V1906-27，保藏号为CGMCC No.18060。需要进一步研究该菌株的产酸性能，以提高发酵产酸效率。优先权申请号2022105119774，申请日2022.05.12。

发明内容

本发明的目的是解决L-异亮氨酸发酵产酸低、生产成本高的问题，本发明提供一种提高L-异亮氨酸产酸的方法，通过优化发酵培养基组分，使L-异亮氨酸的产酸有较大提高，适合工业化生产。

本发明是通过如下技术方案来实现的。

一种提高L-异亮氨酸发酵产酸的方法，其包括如下步骤：

将黄色短杆菌CGMCC No.18060种子液接入到发酵培养基中，得到L-异亮氨酸发酵液；所述发酵培养基是在常规发酵培养基的基础上添加盐。

优选地，

所述盐为氯化钠。

优选地，

所述常规发酵培养基的组分为：

蔗糖19.8g/L，甘油20g/L，酵母粉4.8g/L，硫酸铵4.0g/L，磷酸二氢钾3.5g/L，磷酸氢二钾8.5g/L，硫酸镁4.8g/L，硫酸亚铁0.02g/L，硫酸锰12.9mg/L,硫酸锌0.27mg/L，硫酸铜0.48mg/L。

优选地，

所述氯化钠的添加量为：

1-8g/L。

具体地，