[发明专利]一种用于提高卷枝毛霉WJ11产γ-亚麻酸产量的方法

说明书

本发明公开了一种用于提高卷枝毛霉WJ11产γ‑亚麻酸产量的方法，包括以下步骤：步骤1、菌种分离筛选，选用的菌种为卷枝毛霉WJ11；步骤2、制备PDA斜面培养基；步骤3、制备摇瓶基；步骤4、制备液体培养基；步骤5、固体原料发酵；步骤6、孢子分离；本发明依次进行菌种分离筛选，选用的菌种为卷枝毛霉WJ11；制备PDA斜面培养基；制备摇瓶基；制备液体培养基；固体原料发酵；孢子分离；本发明使用卷枝毛霉WJ11菌体，并采用固体原料发酵方式，与液态发酵相比，油脂含量偏低，而亚麻酸的比例更高，液态发酵亚麻酸比例只有12‑14％，而固态发酵孢子的亚麻酸比例能达到20％以上，提高了亚麻酸的产量。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体为一种用于提高卷枝毛霉WJ11产γ-亚麻酸产量的方法。

背景技术

亚麻酸是人体不能缺少、自身又不能合成的必需脂肪酸，属于维生素F样物质；人体一旦缺乏，其免疫、心脑血管、生殖内分泌等系统就会出现异常；γ-亚麻酸在人体可转化成前列腺素E1，能抑制血小板的聚集和血栓素A2的形成，有明显的抗血栓及抗动脉粥样斑块形成的作用，能显著降低高血脂、胆固醇和血糖，降低密度脂蛋白等，延缓衰老和女性经前症状也有显著疗效；另一方面，γ-亚麻酸外用是优秀的调理剂和营养补充剂，能增进血液流通和细胞的新陈代谢。

亚麻酸人体不能自身合成，现有技术通常是采用微生物培养的方式制备亚麻酸，现有的亚麻酸产量交底，因此，提出了一种能够提高亚麻酸产量的制备工艺。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于提高卷枝毛霉WJ11产γ-亚麻酸产量的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种用于提高卷枝毛霉WJ11产γ-亚麻酸产量的方法，包括以下步骤：

步骤1、菌种分离筛选

选用的菌种为卷枝毛霉WJ11；

步骤2、制备PDA斜面培养基；

步骤3、制备摇瓶基

将麸皮加水1000ml煮沸10分钟，然后过滤，再定容1000ml，接着加入葡萄糖、酒石酸铵、酵母粉、氯化钙、硫酸镁和磷酸二氢钾；将做好的PDA斜面培养基接种到摇瓶中；

步骤4、制备液体培养基

将麦芽糊精、蛋白胨、葡萄糖、麸皮、消泡剂和水均匀混合，然后在121℃条件下灭菌处理40分钟；然后冷却至35℃，并接入到摇瓶基中，接种量为1.2L/1000L；然后在29℃-31℃条件下，培养24小时；

步骤5、固体原料发酵

将麸皮、葡萄糖、硫酸铵和酵母膏混合均匀，然后在121℃条件下，蒸煮50分钟；然后冷却至35℃，然后和卷枝毛霉WJ11接种到液体培养基中，接种时流速要慢，并且灭菌罐须旋转，菌种拌匀后，料的初始水含量约在55％-60％；然后进行装盘，装盘厚度为3cm，装盘完成后室温调节30℃，进行培养，室温升高超过35℃时并有失水时开始通过喷淋无菌凉水降温及补水；喷淋凉水时，每次喷淋时间不能过长，持续培养120小时；

步骤6、孢子分离

采用风分离装置进行物理分离，得到发酵孢子，并全部通过100目筛过滤。

其中，所述PDA斜面培养基按重量份包括以下组份：去皮土豆200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL。

其中，所述PDA斜面培养基的制备方法包括以下步骤：

(1)、称量和熬煮

按重量份分别称取去皮土豆、葡萄糖和琼脂，将去皮土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，然后用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取，再滤液补充水分到1000ml；