[发明专利]一种用于提高卷枝毛霉WJ11产γ-亚麻酸产量的方法

权利要求书

1.一种用于提高卷枝毛霉WJ11产γ-亚麻酸产量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、菌种分离筛选

选用的菌种为卷枝毛霉WJ11；

步骤2、制备PDA斜面培养基；

步骤3、制备摇瓶基

将麸皮加水1000ml煮沸10分钟，然后过滤，再定容1000ml，接着加入葡萄糖、酒石酸铵、酵母粉、氯化钙、硫酸镁和磷酸二氢钾；将做好的PDA斜面培养基接种到摇瓶中；

步骤4、制备液体培养基

将麦芽糊精、蛋白胨、葡萄糖、麸皮、消泡剂和水均匀混合，然后在121℃条件下灭菌处理40分钟；然后冷却至35℃，并接入到摇瓶基中，接种量为1.2L/1000L；然后在29℃-31℃条件下，培养24小时；

步骤5、固体原料发酵

将麸皮、葡萄糖、硫酸铵和酵母膏混合均匀，然后在121℃条件下，蒸煮50分钟；然后冷却至35℃，然后和卷枝毛霉WJ11接种到液体培养基中，接种时流速要慢，并且灭菌罐须旋转，菌种拌匀后，料的初始水含量约在55％-60％；然后进行装盘，装盘厚度为3cm，装盘完成后室温调节30℃，进行培养，室温升高超过35℃时并有失水时开始通过喷淋无菌凉水降温及补水，持续培养120小时；

步骤6、孢子分离

采用风分离装置进行物理分离，得到发酵孢子，并全部通过100目筛过滤。

2.根据权利要求1所述的一种用于提高卷枝毛霉WJ11产γ-亚麻酸产量的方法，其特征在于：所述PDA斜面培养基按重量份包括以下组份：去皮土豆200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL。

3.根据权利要求2所述的一种用于提高卷枝毛霉WJ11产γ-亚麻酸产量的方法，其特征在于：所述PDA斜面培养基的制备方法包括以下步骤：

(1)、称量和熬煮

按重量份分别称取去皮土豆、葡萄糖和琼脂，将去皮土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，然后用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取，再滤液补充水分到1000ml；

(2)、加热溶解

把滤液放入锅中，加入葡萄糖和琼脂，待琼脂完全溶解后，再定容1000ml；

(3)、分装

将配制的培养基分装入试管内，分装时用三角漏斗以免使培养基沾在管口上造成污染；

(4)、加棉塞

培养基分装完毕后，在试管口塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能；

(5)、包扎

加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

4.根据权利要求1所述的一种用于提高卷枝毛霉WJ11产γ-亚麻酸产量的方法，其特征在于：所述摇瓶基按重量包括以下组份：麸皮20g、葡萄糖10g、酒石酸铵3.3g，酵母粉1.5g，氯化钙0.1g，硫酸镁2g，磷酸二氢钾1.5g。

5.根据权利要求1所述的一种用于提高卷枝毛霉WJ11产γ-亚麻酸产量的方法，其特征在于：所述液体种子培养基按质量百分比包括以下组份：麦芽糊精5.6％，蛋白胨1.0％，葡萄糖3.0％，麸皮2％，消泡剂0.1％，余量为水。

6.根据权利要求1所述的一种用于提高卷枝毛霉WJ11产γ-亚麻酸产量的方法，其特征在于：所述固体原料按重量份包括以下组份：麸皮500kg，葡萄糖20kg，硫酸铵5kg，酵母膏5kg。