[发明专利]一种提高干细胞外泌体产量的培养液有效
申请号: | 202110962140.7 | 申请日: | 2021-08-20 |
公开(公告)号: | CN113583952B | 公开(公告)日: | 2022-09-16 |
发明(设计)人: | 申重阳 | 申请(专利权)人: | 成都中医药大学;申重阳 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 魏静;张娟 |
地址: | 610000 *** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 干细胞 外泌体 产量 培养液 | ||
1.一种培养液,其特征在于:所述培养液包括以下组分:
组分1:基础培养液;
组分2:血清和/或血清替代品;
组分3:炎症因子;
组分4:活性多肽;
组分5:细胞信号通路抑制剂;
组分3中,所述炎症因子为白介素-6;组分4中,所述活性多肽为磷酸化MARCKSPeptide,其序列为:Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Arg-Phe-{pSer}-Phe-Lys-Lys-{pSer}-Phe-Lys-Leu-Ser-Gly-Phe-{pSer}-Phe-Lys-Lys-Asn-Lys-Lys;组分5中,所述细胞信号通路抑制剂为Quercetin D5;
所述培养液中,血清的体积分数为2%,血清替代品的体积分数为10%,炎症因子的浓度为10pg/mL,活性多肽的浓度为10mM,细胞信号通路抑制剂的浓度为5μM。
2.根据权利要求1所述的培养液,其特征在于:所述培养液包括以下组分:
组分1:基础培养液;
组分2:血清和血清替代品;
组分3:炎症因子;
组分4:活性多肽;
组分5:细胞信号通路抑制剂。
3.根据权利要求1~2任一项所述的培养液,其特征在于:组分1中,所述基础培养液为用于培养干细胞的无血清培养基;
和/或,组分2中,所述血清为胎牛血清,所述血清替代品为Ultroser G。
4.根据权利要求3所述的培养液,其特征在于:组分1中,所述基础培养液为DMEM/F12。
5.一种制备权利要求1~4任一项所述培养液的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:将组分1~5混合均匀,即得。
6.一种制备干细胞外泌体的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:利用权利要求1~4任一项所述的培养液培养干细胞,然后提取外泌体;所述干细胞为脐带间充质干细胞。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于: 所述提取外泌体的方法为差速超速离心法。
8.权利要求1~4任一项所述的培养液在制备干细胞外泌体中的用途,所述干细胞为脐带间充质干细胞。
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