[发明专利]一种提高抗药抗体分析中药物耐受的操作方法

权利要求书

1.一种提高抗药抗体分析中药物耐受的操作方法，其特征在于：具体步骤如下：

(S1)、样品酸化：对药物样品进行稀释，再将稀释的样品加入稀释板中，并在稀释板中加入甘氨酸，然后放入恒温震荡仪上进行孵育；

(S2)、SA磁珠清洗：取SA磁珠置于磁力架上，再移去上清液体，加入2％BSA涡旋，重复两次；

(S3)、磁珠封闭：将SA磁珠置于磁力架上，移去上清液体，加入2％BSA，再放置于垂直混匀仪中进行室温孵育；

(S4)、生物素化的药物孵育：在步骤(S1)的稀释板中加入生物素标记的药物(Biotin-Drug)，继续在恒温震荡仪上进行孵育；

(S5)、磁珠富集：将经过封闭的SA磁珠加入稀释板中，继续在恒温震荡仪上进行孵育以结合样本中的抗药抗体；

(S6)、磁珠清洗：将稀释板置于磁板上，待磁珠富集抗药抗体后移去上清液体，通过PBST吹洗磁珠，重复四次；

(S7)、磁珠酸化：将稀释板置于磁板上，去除上清液体，再加入甘氨酸后放入恒温震荡仪上进行抗药抗体的洗脱；

(S8)、中和孵育：将稀释板上酸化后的样品加入Tris-HCl，再放入恒温震荡仪上进行孵育。

2.如权利要求1所述的一种提高抗药抗体分析中药物耐受的操作方法，其特征在于：所述步骤(S2)使用SA磁珠。

3.如权利要求1所述的一种提高抗药抗体分析中药物耐受的操作方法，其特征在于：所述步骤(S1)和所述步骤(S7)中的甘氨酸浓度均为0.3M，所述甘氨酸的PH值均为2.0-3.0。

4.如权利要求1所述的一种提高抗药抗体分析中药物耐受的操作方法，其特征在于：所述步骤(S2)中的SA磁珠的浓度为10mg/mL。

5.如权利要求1所述的一种提高抗药抗体分析中药物耐受的操作方法，其特征在于：所述步骤(S2)和所述步骤(S3)中的BSA是以PBST作为溶液，所述步骤(S2)中单次涡旋的时间为1min，所述步骤(S3)中垂直混匀仪的孵育时间大于60min。

6.如权利要求1所述的一种提高抗药抗体分析中药物耐受的操作方法，其特征在于：所述步骤(S4)中的恒温震荡仪的孵育时间为60min±10min，温度为室温，转速为800rpm。

7.如权利要求1所述的一种提高抗药抗体分析中药物耐受的操作方法，其特征在于：所述步骤(S5)中的恒温震荡仪的孵育时间为60min±10min，温度为室温，转速为800-1200rpm。

8.如权利要求1所述的一种提高抗药抗体分析中药物耐受的操作方法，其特征在于：所述步骤(S6)中吹洗磁珠的PBST的量为稀释板每孔200μL。

9.如权利要求1所述的一种提高抗药抗体分析中药物耐受的操作方法，其特征在于：所述步骤(S7)中恒温震荡仪上洗脱时间为10min，温度为室温，转速为800-1200rpm。

10.如权利要求1所述的一种提高抗药抗体分析中药物耐受的操作方法，其特征在于：所述步骤(S8)中的恒温震荡仪的孵育时间为60min±5min，温度为室温，转速为600rpm。