[发明专利]一种提高细胞成活率的鸡小黄卵泡膜细胞的体外培养方法在审
| 申请号： | 202110755938.4 | 申请日： | 2021-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN113481151A | 公开（公告）日： | 2021-10-08 |
| 发明（设计）人： | 李春苗;赵振华;贾雪波;黄华云;王钱保;黄正洋;黎寿丰;吴兆林;屠云洁;沈海玉;薛龙岗 | 申请（专利权）人： | 江苏省家禽科学研究所 |
| 主分类号： | C12N5/075 | 分类号： | C12N5/075 |
| 代理公司： | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 程小芳 |
| 地址： | 225000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 细胞 成活率 鸡小黄 卵泡 体外 培养 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种提高细胞成活率的鸡小黄卵泡膜细胞的体外培养方法，其特征在于，所述体外培养方法具体为：
(1)将离体的鸡小黄卵泡的膜层与胶原酶混合进行消化，消化后过滤得到细胞悬液；
(2)将步骤(1)获得的细胞悬液离心，获得的沉淀即为鸡小黄卵泡膜细胞；
(3)将步骤(2)获得的鸡小黄卵泡膜细胞与细胞培养液混合培养，得到鸡小黄卵泡膜细胞系。
2.根据权利要求1所述的体外培养方法，其特征在于，所述鸡小黄卵泡的膜层的制备方法为：去除离体的鸡小黄卵泡的颗粒层，获得所述鸡小黄卵泡的膜层。
3.根据权利要求1所述的体外培养方法，其特征在于，所述胶原酶为II型胶原酶。
4.根据权利要求1所述的体外培养方法，其特征在于，所述鸡小黄卵泡的膜层为破碎的鸡小黄卵泡的膜层。
5.根据权利要求1所述的体外培养方法，其特征在于，所述细胞培养液由鸡血清、DMEM和双抗以2:8:0.001的体积比配置而成。
6.根据权利要求5所述的体外培养方法，其特征在于，所述双抗为青霉素和链霉素。
7.根据权利要求6所述的体外培养方法，其特征在于，所述青霉素工作浓度为100U/ml；所述链霉素的工作浓度为0.1mg/ml。
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