[发明专利]一种基于低共熔溶剂提高全细胞制备D-阿洛酮糖催化效率的方法

权利要求书

1.一种基于低共熔溶剂提高全细胞制备D-阿洛酮糖催化效率的方法，其特征在于，包括以下步骤：将低共熔溶剂与相应缓冲液混合作为催化体系，加入表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶基因DPE和木糖异构酶基因XYLA的重组菌株作为催化剂，催化转化D-葡萄糖为D-阿洛酮糖。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的低共熔溶剂为氯化胆碱/甘油、氯化胆碱/尿素、氯化胆碱/乙二醇、氯化胆碱/木糖、氯化胆碱/乙酰胺、氯化胆碱/乙醇和氯化胆碱/咪唑中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的低共熔溶剂是通过如下方法制备得到的：将氯化胆碱和氢键供体以物质的量比1：2-2：1混合放入高温反应釜，于80℃-90℃搅拌混匀至形成均一透明的液体，冷却至室温后取出，制备得到低共熔溶剂。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的缓冲液为磷酸钠盐缓冲液、甘氨酸-氢氧化钠缓冲液或柠檬酸盐缓冲液，pH 7.0-9.0。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的低共熔溶剂与缓冲液混合的体积比为1-40：100。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的催化转化反应条件为：30℃-60℃、pH7.0-9.0，反应时间2-48h。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶基因DPE和木糖异构酶基因XYLA的重组菌株的宿主菌株为大肠杆菌、酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、芽孢杆菌或乳酸杆菌。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶基因DPE和木糖异构酶基因XYLA的重组菌株的宿主菌株为大肠杆菌BL21(DE3)。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述的表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶基因DPE和木糖异构酶基因XYLA的重组菌株为经过IPTG诱导的大肠杆菌BL21/DPE-XYLA。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶基因DPE和木糖异构酶基因XYLA的重组菌株的加入量为10-200mg细胞湿重/mL反应体系，D-葡萄糖底物浓度为10-200g/L。