[发明专利]一种提高青蒿中青蒿素含量的方法有效

专利信息
申请号: 202110529211.4 申请日: 2021-05-14
公开(公告)号: CN113403323B 公开(公告)日: 2022-06-24
发明(设计)人: 赵静雅;何毅隆;黎凌;付雪晴;孙小芬;唐克轩 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/14
代理公司: 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 代理人: 郑立
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 提高 青蒿 青蒿素 含量 方法
【权利要求书】:

1.如SEQ ID NO.1所示的核酸在提高青蒿中青蒿素含量中的应用。

2.一种提高青蒿中青蒿素含量的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:将SEQ IDNO.1所示的核酸导入所述青蒿中,得到含有所述核酸的再生转基因青蒿。

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

步骤1、根据所述核酸构建得到表达载体;

步骤2、将所述表达载体转入农杆菌,再将所述农杆菌转入青蒿中;

步骤3、通过抗生素筛选,获得含有所述核酸的再生转基因青蒿。

4.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述核酸的制备方法包括:

根据青蒿的总RNA反转录得到cDNA,并根据所述cDNA扩增得到所述核酸。

5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述根据所述cDNA扩增得到所述核酸中,引物具有如SEQ ID NO.2和如SEQ ID NO.3所示的序列。

6.如权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤1中,根据所述核酸构建得到表达载体具体包括:

在所述核酸的5’和3’端引入BamHI和SpeI酶切位点,将pHB-GFP载体双酶切成线性化载体,并通过Infusion无缝克隆技术将所述核酸与pHB-GFP线性化载体连接,得到表达载体。

7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,采用冻融法将所述表达载体转入所述农杆菌中。

8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,将所述农杆菌转入青蒿中具体包括:将转入所述表达载体的农杆菌与所述青蒿的外植体共培养。

9.如权利要求2-8任一项所述的方法,其特征在于,所述再生转基因青蒿中腺毛密度大于等于30个每平方毫米。

10.如权利要求2-8任一项所述的方法,其特征在于,所述再生转基因青蒿的青蒿素含量大于等于15mg/g DW。

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