[发明专利]一种基于酶催化法提高侧向层析灵敏度的方法

权利要求书

1.一种基于酶催化法提高侧向层析检测灵敏度的方法，是将酶联免疫和示踪标志物联合使用。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：在侧向层析检测过程中引入如下两步操作：

步骤一：在位于侧向层析试纸条的示踪标志物结合垫中的“检测物-示踪标志物”复合物与待测物结合的过程中，引入酶联免疫用酶，形成含有待测物、检测物、示踪标志物和酶联免疫用酶的复合物；

步骤二：在位于侧向层析试纸条的层析膜中的检测线处的捕获物与所述含有待测物、检测物、示踪标志物和酶联免疫用酶的复合物结合后，引入所述酶联免疫用酶对应的显色底物。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：在所述步骤一中，所述酶联免疫用酶通过共价键与所述示踪标志物相结合；或，所述酶联免疫用酶通过非共价键与所述示踪标志物相结合；所述酶联免疫用酶与载体相连，所述载体与所述示踪标志物通过共价键或非共价键相连；或，所述酶联免疫用酶与封闭剂相连，所述封闭剂与所述示踪标志物通过非共价键相连；或，所述酶联免疫用酶被标记在所述检测物上。

4.一种酶联侧向层析试纸条，其特征在于：所述酶联侧向层析试纸条与侧向层析试纸条的差别仅在于示踪标志物结合垫上包被的是含有检测物、示踪标志物和酶联免疫用酶的复合物。

5.含有权利要求4所述酶联侧向层析试纸条的试剂盒。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中还含有所述酶联免疫用酶对应的显色底物。

7.权利要求4所述酶联侧向层析试纸条或权利要求5所述的试剂盒在提高侧向层析检测灵敏度中的应用。

8.酶联免疫用酶和所述酶联免疫用酶对应的显色底物在提高侧向层析检测灵敏度中的应用。

9.根据权利要求1-8中任一所述的方法或酶联侧向层析试纸条或试剂盒或应用，其特征在于：所述酶联免疫用酶为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶或半乳糖苷酶或其他能够生成有色底物的酶；和/或

所述示踪标志物选自如下任一：胶体金，乳胶微球，荧光微球；

进一步地，所述侧向层析为免疫胶体金。

10.根据权利要求9所述的方法或酶联侧向层析试纸条或试剂盒或应用，其特征在于：当所述酶联免疫用酶为辣根过氧化物酶时，所述酶联免疫用酶对应的显色底物为3,3',5,5'-四甲基联苯胺或二氨基联苯胺或3-氨基-9-乙基咔唑或4-氯-1萘酚或其他沉淀型辣根过氧化物酶显色底物；

当所述酶联免疫用酶为碱性磷酸酶时，所述酶联免疫用酶对应的显色底物为5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸酯对甲苯胺盐或氯化硝基四氮唑兰/萘酚AS-BI磷酸盐或萘酚-AS-MX-磷酸盐或其他沉淀型碱性磷酸酶显色底物；

当所述酶联免疫用酶为半乳糖苷酶时，所述酶联免疫用酶对应的显色底物为5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷或5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷或其他沉淀型半乳糖苷酶显色底物。