[发明专利]一种提高发酵冬虫夏草菌丝体产量的方法

权利要求书

1.一种提高发酵冬虫夏草菌丝体产量的方法，其特征在于，发酵生产工艺包括以下步骤：

S1.斜面培养：选用中国被毛孢菌（ Hirsutella sinensis）为菌种，无菌条件下，将中国被毛孢菌接种到斜面培养基上，16～20℃恒温培养5～7天；

S2.摇瓶培养：无菌条件下，将步骤S1培养好的菌种全部接入摇瓶培养基内，置于16～20℃恒温培养，摇床转速220～260r/min，暗处培养5～7天；

S3.种子扩大培养：无菌条件下，将步骤S2中培养好的菌种按5.0～10.0％的接种量接入种子扩大培养基中，16～20℃恒温培养，罐压0.05～0.10Mpa，通气量1:(1.0～1.6)(V/V)，暗处培养6～9天；

S4.发酵培养：无菌条件下，将步骤S3中培养好的菌种按10.0～20.0％的接种量接入发酵培养基中，16～20℃恒温培养，罐压0.05～0.10Mpa，通气量1:(0.9～1.5)(V/V)，暗处培养6～9天；

S5.发酵带放再培养：无菌条件下，将步骤S4中培养好的菌种按20.0～55.0％的接种量接入发酵带放再培养基中，16～20℃恒温培养，罐压0.05～0.10Mpa，通气量1:(0.9～1.5)(V/V)，暗处培养6～12天；

S5中发酵带放再培养为连续带放再培养多次，且带放量为原发酵罐的50～80％；

所述各培养基组成成分如下：

(1)斜面培养基：以重量百分比计，葡萄糖1.5～3.5％、土豆汁2.0～4.5％、琼脂2.5～4.5％、蛋白胨0.3～1.5％、磷酸二氢钾0.05～0.25％、硫酸镁0.01～0.05％、维生素B10.05～0.15％，其余为水；

(2)摇瓶培养基：以重量百分比计，葡萄糖2.0～4.5％、牛肉膏2.0～4.5％、土豆粉1.0～2.5％、蛋白胨1.0～2.5％、磷酸二氢钾0.05～0.25％、硫酸镁0.01～0.05％、菊粉0.2～1.5％、维生素B10.05～0.15％、醋酸锌0.01～0.06％，其余为水；

(3)种子扩大培养培养基：以重量百分比计，葡萄糖1.0～2.5％、酵母膏1.5～3.5％、蛋白胨0.5～2.0％、硫酸镁0.01～0.05％、磷酸二氢钾0.05～0.25％、菊粉0.2～1.5％、维生素B10.05～0.1％、醋酸锌0.01～0.05％，其余为水；

(4)发酵培养基：以重量百分比计，葡萄糖0.5～2.0％、玉米粉1.0～2.5％、蚕蛹粉0.5～2.0％、酵母浸粉0.1～1.0％、硫酸镁0.01～0.05％、磷酸二氢钾0.05～0.25％、菊粉0.2～1.5％、维生素E0.05～0.10％、维生素B10.01～0.05％、醋酸锌0.01～0.05％、谷氨酸0.15～0.45％，天冬氨酸0.10～0.35％，其余为水；

(5)发酵带放再培养发酵培养基：以重量百分比计，葡萄糖0.5～2.0％、玉米粉1.0～2.5％、蚕蛹粉0.5～2.0％、酵母浸粉0.1～1.0％、硫酸镁0.01～0.05％、磷酸二氢钾0.05～0.25％、菊粉0.2～1.5％、维生素E0.05～0.10％、维生素B10.01～0.05％、醋酸锌0.01～0.05％、谷氨酸0.15～0.45％，天冬氨酸0.10～0.35％，其余为水。

2.根据权利要求1所述的一种提高发酵冬虫夏草菌丝体产量的方法，其特征在于，所述各培养基中玉米粉和蚕蛹粉均经预处理后加入培养基中，其处理过程为：将玉米粉和蚕蛹粉分别粉碎、筛分过40目筛、混合，再将混合配料加入液化罐，加水配成液化料，加入相对于底物为0.15～0.35％的碳酸钙、0.15～0.75％的碱性蛋白酶进行酶解；再加入0.30～0.90％的淀粉酶进行酶解，过滤，获得澄清透明料液。

3.根据权利要求2所述的一种提高发酵冬虫夏草菌丝体产量的方法，其特征在于，所述玉米粉和蚕蛹粉的重量份比例为玉米粉：蚕蛹粉＝(0.6：1.0)～(1：1.5)，液化料的浓度为2.0～7.0％。

4.根据权利要求2所述的一种提高发酵冬虫夏草菌丝体产量的方法，其特征在于，所述碱性蛋白酶的酶解条件为：pH7.5～8.5，酶解温度50℃～60℃，酶解时间1.5～3.5h。