[发明专利]一种提高酶解乳清蛋白中胆固醇肽降解率的方法

说明书

本发明属于胆固醇肽降解技术领域，具体提供了一种提高酶解乳清蛋白中胆固醇肽降解率的方法，所述制备方法包括如下步骤，所述方法包括将灭酶后的酶解乳清蛋白溶液冷却至20~30℃，在4000×g~10000×g条件下离心，并加入苹果酸，混匀搅拌。本发明利用苹果酸结合复合酶解对乳清蛋白进行处理，制备乳清蛋白降胆固醇肽，得到的产品其水解度及胆酸盐结合率较传统制备方法来说，有显著提高，即降胆固醇肽的产量及其降胆固醇活性更佳。将其应用到功能性食品当中，发挥社会经济效应。

技术领域

本发明属于胆固醇肽降解技术领域，具体涉及一种提高酶解乳清蛋白中胆固醇肽降解率的方法。

背景技术

随着人们生活水平的不断提高，对于健康食品的需求量不断增加，人们日常生活饮食结构也在改变，随之而来的是发病率的升高，如高血压、高血糖、高血脂等慢性疾病，于是对于具有降胆固醇等保健功效的食品成分的研究得到了大家的关注，也成为近年来的研究热点。

高血脂症是我国目前致死率较高的慢性病之一,而现阶段治疗的主要方法是采用降低血液中胆固醇含量的靶向药物治疗,其中存在治疗费用高昂、具有较大的毒副作用等缺陷。乳清有较高的营养价值,当乳清蛋白被蛋白酶水解以后,会产生许多具有生物活性的序列,经过释放后,即成为我们所熟知的生物活性肽。但是目前对于水解乳清蛋白获得降血压肽并研究其功效的实验居多,而对于更具研究意义的乳清蛋白降胆固醇肽的研究较局限。

苹果酸是天然安全原料，来源丰富且成本低，其在物质代谢途径中处于特殊位置，可直接参与人体代谢、被人体直接吸收、实现短时间内向肌体提供能量和消除疲劳等作用，利用苹果酸的众多优点可以很好的与食品应用进行结合，创造出更多的价值。多肽的制备一般是通过生物化学手段将蛋白质水解，以发挥更优的功效，故对其制备方法的研究是至关重要的。对于降胆固醇肽的制备方法有很多中，包括酶解法、发酵法、化学法等，应用较多的是酶解法，但单一酶解的方式成本高，酶解效率有限，现多采用复合酶解以及与微波或超声等高新技术结合的优化工艺。

传统的乳清蛋白降胆固醇肽的方法，主要存在操作复杂、产量及降胆固醇活性低等不足，导致对于肽的提取及利用率不高，很大程度上限制了其在食品工业的运用。因此，对于乳清蛋白降胆固醇肽高活性成品的制备方法的研究尤为重要。

发明内容

本发明提供了一种提高酶解乳清蛋白中胆固醇肽降解率的方法，解决了单一酶解乳清蛋白的方法胆固醇肽降解率不高，成本高的技术问题，所述方法如下：

一种提高酶解乳清蛋白中胆固醇肽降解率的方法，包括将灭酶后的酶解乳清蛋白溶液冷却至20~30℃，在4000 × g ~10000 × g条件下离心，并加入苹果酸，混匀搅拌。搅拌速度1000~2000rpm，搅拌时间为15~25min。

其中，所述苹果酸的添加量为2.0~2.5%(w/v)。

其中，所述离心的时间为8~20 min。

其中，所述乳清蛋白溶液的浓度为6~8%(w/v)。

其中，所述酶解的方法为在pH为7.0~9.0，40~50℃的条件下用胰蛋白酶水解，再在pH为7.0，45~55℃的条件下用中性蛋白酶水解。

其中，所述胰蛋白酶的加酶量为4~5.6%(w/v)，中性蛋白酶的加酶量为1~1.4%(w/v)。

其中，所述胰蛋白酶的酶活力大于等于250 U/mg，中性蛋白酶的酶活力大于等于100 U/mg。

其中，所述胰蛋白酶的水解时间为7~9 h，中性蛋白酶的水解时间为1.75~2.25 h。

其中，所述灭酶的条件为在90±5℃ 的条件下灭酶8~20 min。

其中，所述冷却至20~30℃具体为在3 min内迅速冷却至20~30℃。