[发明专利]一种提高重组蛋白表达量的方法在审
| 申请号： | 202110176391.2 | 申请日： | 2021-02-09 |
| 公开（公告）号： | CN114908119A | 公开（公告）日： | 2022-08-16 |
| 发明（设计）人： | 梁千惠;刘阳 | 申请（专利权）人： | 佛山汉腾生物科技有限公司;广州汉腾生物科技有限公司;佛山普津生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/62;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京睿阳联合知识产权代理有限公司 11758 | 代理人： | 张颖;郭奥博 |
| 地址： | 528315 广东省佛山市顺德区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 重组 蛋白 表达 方法 | ||
1.一种提高重组蛋白表达量的方法，其特征在于，包括如下步骤：将编码FABP5蛋白的基因转入用于表达重组蛋白的细胞中，使FABP5蛋白瞬时或稳定表达；所述重组蛋白不为所述FABP5蛋白。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：将具有编码FABP5蛋白的基因的载体转入用于表达重组蛋白的细胞中；
优选地，所述基因经过了密码子优化；和/或，所述载体中还插入了蛋白标签，优选为组氨酸标签；和/或，所述载体为真核细胞表达载体，优选为pcDNA3.1载体。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞为哺乳动物细胞；
优选地，所述哺乳动物细胞选自CHO细胞、HEK293细胞和Vero细胞。
4.根据权利要求1～3任意一项所述的方法，其特征在于，所述细胞为表达重组蛋白的单克隆细胞，或为外源转入了重组蛋白表达载体的细胞；
优选地，所述重组蛋白选自单克隆抗体和融合蛋白；所述融合蛋白优选为Fc融合蛋白。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：合成CHO细胞的编码FABP5蛋白的基因并连接编码组氨酸标签的基因，优选合成如SEQ ID NO:1所示的基因序列，然后构建到pcDNA3.1载体中，将所得载体转染到能够表达重组蛋白的单克隆CHO细胞中，或者将所得载体与所述重组蛋白的表达载体共同转染到CHO细胞中。
6.高表达重组蛋白的细胞，其特征在于，所述细胞还能够瞬时或稳定过表达FABP5蛋白，所述重组蛋白不为所述FABP5蛋白；
优选地，所述细胞中外源转入了编码FABP5蛋白的基因。
7.根据权利要求6所述的细胞，其特征在于，所述细胞中外源转入了具有编码FABP5蛋白的基因的载体；
优选地，所述基因经过了密码子优化；和/或，所述载体中还具有蛋白标签，优选为组氨酸标签；和/或，所述载体为真核细胞表达载体，优选为pcDNA3.1载体。
8.根据权利要求6所述的细胞，其特征在于，所述细胞为哺乳动物细胞；
优选地，所述哺乳动物细胞选自CHO细胞、HEK293细胞和Vero细胞。
9.根据权利要求6～8任意一项所述的细胞，其特征在于，所述细胞为表达重组蛋白的单克隆细胞，或为外源转入了重组蛋白表达载体的细胞；
优选地，所述重组蛋白选自单克隆抗体和融合蛋白；所述融合蛋白优选为Fc融合蛋白。
10.根据权利要求6所述的细胞，其特征在于，所述细胞为表达重组蛋白的单克隆CHO细胞，其中外源转入了pcDNA3.1载体；所述pcDNA3.1载体中插入了CHO细胞的编码FABP5蛋白的基因和编码组氨酸标签的基因，优选插入了如SEQ ID NO:1所示的基因序列；
或者，所述细胞为CHO细胞，其中外源转入了重组蛋白表达载体和pcDNA3.1载体；所述pcDNA3.1载体中插入了CHO细胞的编码FABP5蛋白的基因和编码组氨酸标签的基因，优选插入了如SEQ ID NO:1所示的基因序列。
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