[发明专利]一种养殖水体中金刚乙胺和美金刚的检测方法

权利要求书

1.一种养殖水体中金刚乙胺和美金刚的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

将待测养殖水体和内标物混合，将所得混合液过滤，得到待测养殖水精滤液；将所述待测养殖水精滤液上HLB柱，得到吸附柱；采用甲醇洗脱吸附柱，将洗脱液作为待测液；所述内标物为金刚乙胺-D4；

采用液质联用法对所述待测液进行检测，得到养殖水体中金刚乙胺/金刚乙胺-D4峰面积比值和美金刚/金刚乙胺-D4峰面积比值；

基于金刚乙胺浓度-峰面积比值标准曲线、美金刚浓度-峰面积比值标准曲线，得到养殖水体中金刚乙胺和美金刚的浓度；

所述液质联用法的参数包括液相色谱参数和质谱参数；

所述液相色谱参数包括：

色谱柱：C18柱，2.1mm×100mm，粒径1.9μm；

流动相A：甲醇；

流动相B：体积浓度为0.1％的甲酸水溶液；

流速：0.25mL/min；

梯度洗脱程序为：

0min：5％A+95％B；

0.5min：5％A+95％B；

3min：95％A+5％B；

5min：95％A+5％B；

6min：5％A+95％B；

7min：5％A+95％B；

所述质谱参数包括：

离子源：电喷雾电离；

检测方法：多反应监测模式；

毛细管电压：3500V；

离子源温度：350℃；

壳气：40；

辅助气：12；

离子传输管温度：350℃；

化合物离子参数：

金刚乙胺：母离子180.213；子离子81.22，107.17，163.1；s-lens：80；碰撞能量：22ev，24ev，17ev；

美金刚：母离子180.152；子离子91.17，107.24，163.1；s-lens，76；碰撞能量：38ev，25ev，14ev；

金刚乙胺-D4：母离子184.183；子离子：167.1；s-lens：88；碰撞能量：16ev。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述混合液中金刚乙胺-D4的浓度为10～50μg/L。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述过滤用滤膜为纤维滤膜；所述纤维滤膜的孔径为0.45μm。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述HLB柱使用前，依次用甲醇和水进行活化和平衡。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述待测养殖水精滤液上HLB柱的流速为10～20滴/min。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述甲醇的体积与HLB柱的容积的比值为1：1～1：2。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述洗脱液在进行检测前，依次进行氮气吹干和定容；所述定容用试剂为体积浓度为0.1％的甲酸的乙腈乙酸铵溶液，乙腈乙酸铵溶液中乙腈和乙酸铵的体积比为95：5。