[发明专利]催化活性提高的黄酮3β-羟化酶突变体及其应用

权利要求书

1.黄酮3β-羟化酶突变体，其特征在于，所述突变体以氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的黄酮3β-羟化酶为亲本，将亲本第344位的精氨酸突变为丝氨酸，或将第285位的天冬氨酸突变为天冬酰胺。

2.编码权利要求1所述突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的载体。

4.表达权利要求1所述突变体、或含有权利要求2所述基因的微生物细胞。

5.根据权利要求4所述的微生物细胞，其特征在于，所述微生物细胞还表达黄酮3β-羟化酶辅酶。

6.一种全细胞转化生产圣草酚的方法，其特征在于，将权利要求4或5所述微生物细胞加入以柚皮素为底物的反应体系中。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，将所述微生物细胞在25-32℃，200-250rpm培养16-18h，获得种子液，将种子液以1-5mL/100mL的量加入反应体系中。

8.一种生产圣草酚的方法，其特征在于，将权利要求1所述突变体加入含有柚皮素的反应体系中，与黄酮3β-羟化酶的辅酶共同作用，转化生产圣草酚。

9.权利要求1所述突变体、或权利要求3所述载体、或权利要求4或5所述微生物细胞在生产圣草酚或以圣草酚为原料的产品中的应用。