[发明专利]一种L-薄荷醇产量提高的重组酵母菌

权利要求书

1.一种L-薄荷醇产量提高的重组酵母菌，其特征在于，所述的重组酵母菌是以产L-薄荷醇的基因工程菌为出发菌株，表达了法尼基焦磷酸合酶突变体基因ERG20WW和/或橙花二磷酸合酶基因NPPS，所述的产L-薄荷醇的基因工程菌是以酿酒酵母CEN.PK2–1C为宿主，过表达内源MVA合成途径中的甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶基因IDI和截短的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因tHMG1，并异源表达截短的柠檬烯合成酶基因LIS、柠檬烯羟基化酶基因L3H、细胞色素P450还原酶基因CPR、反式异胡椒醇脱氢酶基因IPDH、异薄荷二烯酮还原酶基因IPR、类固醇异构酶基因KSI、长叶薄荷酮还原酶基因PGR和薄荷醇还原酶基因MMR；

其中，截短的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶是将3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶前530个氨基酸序列删除得到，截短的柠檬烯合成酶是将柠檬烯合成酶前56个氨基酸序列删除得到；

所述的甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶的NCBI编号是NP_015208.1，所述的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的NCBI编号是NP_013636.1，柠檬烯合成酶的NCBI编号是AAC37366.1，柠檬烯羟基化酶的NCBI编号是AAD44151.1，细胞色素P450还原酶的NCBI编号是ABB88839.2，反式异胡椒醇脱氢酶的NCBI编号是AAU20370.1，异薄荷二烯酮还原酶的NCBI编号是AAQ75422.1，类固醇异构酶的NCBI编号是AFY18860.1，长叶薄荷酮还原酶的NCBI编号是AAQ75423.1，薄荷醇还原酶的NCBI编号是AAQ55960.1；

所述的法尼基焦磷酸合酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的橙花二磷酸合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的重组酵母菌，其特征在于，所述的法尼基焦磷酸合酶突变体基因ERG20WW和/或橙花二磷酸合酶基因NPPS通过诱导型启动子进行表达。

3.根据权利要求1所述的重组酵母菌，其特征在于，所述的重组酵母菌还过表达了柠檬烯羟基化酶基因L3H。

4.根据权利要求3所述的重组酵母菌，其特征在于，所述的柠檬烯羟基化酶基因L3H通过诱导型启动子进行表达。

5.根据权利要求1所述的重组酵母菌，其特征在于，所述的重组酵母菌还过表达了柠檬烯合成酶和柠檬烯羟基化酶的融合蛋白基因。

6.根据权利要求5所述的重组酵母菌，其特征在于，所述的融合蛋白基因通过诱导型启动子进行表达。

7.权利要求1-6任一项所述的重组酵母菌在发酵生产L-薄荷醇中的应用。