[发明专利]一种提高抗菌肽产量的方法在审
| 申请号: | 202010507204.X | 申请日: | 2020-06-05 |
| 公开(公告)号: | CN111690035A | 公开(公告)日: | 2020-09-22 |
| 发明(设计)人: | 王中振;谢涛 | 申请(专利权)人: | 广州颜如玉生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C07K1/20;C07K1/34;C07K1/36 |
| 代理公司: | 广州科沃园专利代理有限公司 44416 | 代理人: | 张帅 |
| 地址: | 510627 广东省广州市天*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 提高 抗菌 产量 方法 | ||
1.一种提高抗菌肽产量的方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、取鲜萝卜75~100g,用捣碎器捣碎,然后用纱布过滤,除去杂质,收集滤出液,得萝卜提取液;
S2、向步骤S1所得提取液中加入促进剂及鼠尾草提取物,用玻璃棒搅拌均匀,得混合物I;
S3、向步骤S2所得混合物I中加入醋酸溶液,于超声波发生仪中进行超声处理25~30min,然后用纱布过滤,收集滤出液,得提取液;
S4、将步骤S3制得的提取液于65~75℃的条件下水浴加热15~25min,然后降低至室温25℃,离心,取上清液,得混合液I;
S5、将步骤S4所得混合液I进行透析、浓缩,得反相色谱样品,经反相高效液相色谱进一步分离,即可。
2.如权利要求1所述提高抗菌肽产量的方法,其特征在于,步骤S2中的促进剂由蔗糖脂肪酸酯、纤维素酶、生物素按重量比1~1.5:10~13:3~5组成。
3.如权利要求2所述提高抗菌肽产量的方法,其特征在于,步骤S2中的促进剂由蔗糖脂肪酸酯、纤维素酶、生物素按重量比1.3:12:4组成。
4.如权利要求1所述提高抗菌肽产量的方法,其特征在于,步骤S2中各成分的加入量为:促进剂0.5~0.8g,鼠尾草提取物0.3~0.5g。
5.如权利要求1所述提高抗菌肽产量的方法,其特征在于,步骤S3中所述醋酸溶液的体积分数为8~10%,加入量为350~450mL。
6.如权利要求1所述提高抗菌肽产量的方法,其特征在于,步骤S3中所述超声处理的过程为:调节超声波发生仪的功率为350~400W,频率为50kHZ,进行超声处理。
7.如权利要求1所述提高抗菌肽产量的方法,其特征在于,步骤S4中所述的离心过程为于9000~10000rpm的转速下,离心10~15min。
8.如权利要求1所述提高抗菌肽产量的方法,其特征在于,步骤S5中所述的透析时间为36~58h。
9.如权利要求1所述提高抗菌肽产量的方法,其特征在于,步骤S5中所述的经反相高效液相色谱进一步分离的具体过程为:
(1)将所得反相色谱样品利用反相色谱柱进行反相高效液相色谱分离,所述反相色谱柱为C4硅胶柱;
(2)分离后,用含有三氟乙酸的双蒸水和含有三氟乙酸的乙腈对C4硅胶柱进行洗脱处理,得洗脱样品;
(3)将步骤(2)所得洗脱样品经减压浓缩,即得。
10.如权利要求9所述提高抗菌肽产量的方法,其特征在于,步骤(2)所述含有三氟乙酸的双蒸水中三氟乙酸的含量为0.2~0.3%,所述含有三氟乙酸的乙腈中,三氟乙酸的含量为2~3%,乙腈的含量为97~98%。
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