[发明专利]一种提高枯草芽孢杆菌核酸含量的方法

权利要求书

1.一种核糖核酸含量提高的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），其特征在于，敲除了ATP结合蛋白、鞭毛钩帽组件蛋白、鞭毛蛋白中的至少一个蛋白，或沉默了编码ATP结合蛋白、鞭毛钩帽组件蛋白、鞭毛蛋白中的至少一个蛋白的基因；所述ATP结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述鞭毛钩帽组件蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述鞭毛蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。

2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌，其特征在于，以枯草芽孢杆菌168为出发菌株。

3.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的出发菌株经过适应性进化。

4.根据权利要求3所述的枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述适应性进化是将枯草芽孢杆菌在特定的培养基中生长扩增，通过分批培养结合反复转接培养，使能够适应培养基环境的枯草芽孢杆菌逐渐富集成为优势菌株；其中，转接培养的次数不低于4次；所述特定的培养基为M9培养基。

5.一种提高枯草芽孢杆菌核糖核酸含量的方法，其特征在于，敲除或沉默枯草芽孢杆菌的ATP结合蛋白基因oppD、编码鞭毛钩帽组件蛋白的基因flgD或编码鞭毛蛋白的基因Hag中的至少一个；所述ATP结合蛋白基因oppD的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码鞭毛钩帽组件蛋白的基因flgD的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；编码鞭毛蛋白的基因Hag的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。

6.一种生产核糖核酸的方法，其特征在于，将权利要求1~4任一所述的枯草芽孢杆菌在培养基中培养，再收集菌体，破碎细胞。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述培养基为含葡萄糖的M9培养基；所述葡萄糖的浓度为2~5 g/L；所述M9培养基含有Na₂HPO₄·2H₂O、KH₂PO₄、NH₄Cl和NaCl。

8.权利要求1~4任一所述的枯草芽孢杆菌在医药或食品领域制备含核糖核酸的产品方面的应用。