[发明专利]提高微生物转化生成乳糖酸的方法

权利要求书

1.提高微生物转化生成乳糖酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

步骤1）一次发酵：将荧光假单胞菌活化，然后接种到种子培养基上进行培养，得到荧光假单胞菌种子液，将荧光假单胞菌种子液按照5-10％的接种量接种于含有发酵培养基的发酵罐中进行发酵培养20-24h，然后添加促进培养基；继续发酵24-36h，停止发酵，得到发酵液；整个发酵过程中，通过流加氨水控制pH为6.0-6.2；

所述促进培养基的制备方法为：将木质素和氯化钠按照1: 50-100的质量比混匀制得；

所述促进培养基与发酵培养基的比例为：2-3g：1L；

步骤2）二次发酵：将一次发酵的发酵液进行陶瓷膜过滤，收集滤液和湿菌体，将湿菌体打回发酵罐，然后添加二次发酵培养基，继续发酵培养10-14h，停止发酵，将二次发酵液进行过滤，收集滤液；合并两次滤液用于分离提取乳糖酸。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述种子培养基为：按照重量百分比，5%乳糖、2%葡萄糖、1%蛋白胨、0.2%氯化钾、0.1%七水硫酸镁，余量为无菌水。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基为：按照重量百分比，15%乳糖、2%玉米浆、1%甘油、0.5%磷酸氢二钾、0.2%七水硫酸镁、0.01%七水硫酸亚铁、0.001%VB3，余量为无菌水。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述二次发酵培养基为：按照重量百分比，10%乳糖、0.5%玉米浆、0.3%磷酸氢二钾、0.1%七水硫酸镁、0.01%七水硫酸亚铁、0.001%VB3，余量为无菌水。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述陶瓷膜的截留分子量为1万Da。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述二次发酵培养基和湿菌体的体积比为3-5:1。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述促进培养基与发酵培养基的比例为：3g：1L。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述二次发酵培养基和湿菌体的体积比为4:1。