[发明专利]一种提高肠杆菌FY-07发酵生产细菌纤维素的产量和/或性能的方法有效
申请号: | 202010142463.7 | 申请日: | 2020-03-04 |
公开(公告)号: | CN111321184B | 公开(公告)日: | 2022-03-08 |
发明(设计)人: | 马挺;李国强;高歌;曹艺严;张一博 | 申请(专利权)人: | 南开大学 |
主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;C12N1/20;C12R1/19 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 吕纪涛 |
地址: | 300071*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 杆菌 fy 07 发酵 生产 细菌 纤维素 产量 性能 方法 | ||
1.一种提高肠杆菌FY-07发酵生产细菌纤维素的产量和/或提高细菌纤维性能的方法,所述方法由以下步骤组成:将肠杆菌FY-07的种子液和发酵培养基混合,将混合有肠杆菌FY-07种子液的发酵培养基转入培养皿浅盘,浅盘以堆叠的方式,于28~32℃条件下进行发酵培养,收集上层漂浮物,得到细菌纤维素;
所述提高细菌纤维性能包括增加细菌纤维素的纤维直径、提高细菌纤维素的硬度、提高细菌纤维素的弹性和提高细菌纤维素的拉伸强度;
所述肠杆菌FY-07保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心;所述肠杆菌FY-07的保藏号为CGMCC No.6103;
所述发酵培养基包括 HS-XG发酵培养基和无菌葡萄糖水溶液;所述HS-XG发酵培养基和无菌葡萄糖水溶液的体积比为90:8~12;
所述HS-XG发酵培养基以1L计,包括以下原料:黄原胶0.05~0.15g、酵母粉7~8g、蛋白胨8~12g、Na2HPO4 8~12g和余量的水;
所述无菌葡萄糖水溶液中葡萄糖的质量浓度为20~30 g/L。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述肠杆菌FY-07的种子液和发酵培养基的体积比为0.5~1.5:100。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵培养的时间为1~2d。
4.根据权利要求1~3任意一项所述的方法,其特征在于,所述肠杆菌FY-07的种子液采用以下方法制备得到:
将肠杆菌FY-07接种于含有刚果红水溶液的LB固体培养基,于28~32℃培养20~30h,挑取肠杆菌FY-07单菌落;所述LB固体培养基中刚果红水溶液的体积百分含量为0.8%~1.2%;所述刚果红水溶液中刚果红的质量含量为8~12mg/mL;
将肠杆菌FY-07单菌落接种于LB斜面培养基,于28~32℃培养20~30h,用灭菌蒸馏水冲洗LB斜面培养基表面,收集冲洗液,得到肠杆菌FY-07的种子液。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在得到细菌纤维素后,还包括用灭菌蒸馏水对细菌纤维素进行冲洗,将冲洗后的细菌纤维素浸泡于NaOH水溶液中,重复冲洗和浸泡的过程,至细菌纤维素湿膜的pH值为6.8~7.2。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述浸泡的温度为90~100℃,每次浸泡的时间为0.5~1h。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述NaOH水溶液中NaOH的摩尔浓度为0.1M。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,得到pH值为6.8~7.2的细菌纤维素湿膜后,还包括对细菌纤维素湿膜进行干燥。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述干燥的方式包括烘干或真空冷冻干燥。
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