[发明专利]一种提高胶体金免疫层析平台定量分析准确度的方法

说明书

本发明提供了一种提高胶体金免疫层析平台定量分析准确度的方法。具体地，本发明提供了一种标准曲线的建立方法，所述的标准曲线是用于通过基于胶体金的定量分析方法对待测样本中待测目标进行定量分析的标准曲线；且所述的制作方法包括步骤：(1)提供校准品稀释液；(2)用步骤(1)的校准品稀释液配置一系列校准品溶液；(3)通过基于胶体金的检测方法对步骤(2)得到的一系列校准品溶液进行检测并读取检测结果，从而获得一系列校准品溶液中的全部或部分的校准品溶液的检测值和背景值；(4)根据步骤(3)获得的检测值和背景值，计算校准品溶液的最终信号值；和(5)根据浓度以及相应的最终信号值绘制标准曲线。

技术领域

本发明属于体外诊断试剂技术领域，具体涉及一种提高胶体金免疫层析平台定量分析准确度的方法。

背景技术

免疫层析检测技术是八十年代发展起来的一种快速且易于使用的免疫分析技术。免疫层析检测技术的应用领域包括病原体、药物、激素和代谢物等在生物医学上的检测，同时也被广泛用于植物检疫、兽医学、食品安全等领域。免疫层析试纸主要由五部分组成：样品垫，结合垫，硝酸纤维素膜，吸收垫和PVC底板。

根据检测原理不同，免疫层析检测分为双抗体夹心法和竞争法免疫层析检测。

双抗体夹心法免疫层析的检测原理是：以预先包被T线和C线的硝酸纤维素膜为固定层析膜，T线通常包被抗待测物抗体，C线通常包被抗IgG抗体。含待检测物的样本滴加在样品垫上，通过与结合垫上的标记抗体结合，形成抗原-标记抗体复合物，该复合物借助毛细作用，可在硝酸纤维素膜上泳动，与膜上的T线抗体结合而被捕获，形成抗体-抗原-标记抗体三明治夹心结构，而未被结合的抗原-标记复合物则被C线捕获。T线及C线处的标记抗体上所携带的标记物，可被检测，其信号值与样本浓度水平呈正相关。

以免疫层析检测技术为基础，先后发展出了很多不同的免疫层析检测技术分支，例如胶体金免疫层析检测技术和荧光免疫层析检测技术等。胶体金免疫层析检测技术(Colloidal gold immuno-chromatography assay,GICA)是指以胶体金作为标记物，1971年由Faulk W P和Taylor G M首次用来检测大肠埃希菌后，运用胶体金免疫层析技术检测细菌得到了大范围的推广。胶体金免疫检测技术通常使用双抗体夹心法，根据T线的灰度值判定样本浓度水平。胶体金免疫层析检测技术不仅操作简便，检测特异性和稳定性好，而且不需要任何特殊的检测仪器，适合在紧急情况的发病现场进行大规模样本的检测。然而，胶体金免疫层析技术检测灵敏度较低，检测线性范围窄，只能定性或半定量检测，这是胶体金免疫层析法存在的缺陷。目前，虽通过CMOS/CCD采集反射光信号并通过灰度值分析信号强弱，从而换算成浓度值，实现了胶体金免疫层析的定量检测，但目前胶体金免疫层析平台的检测信号易受样本情况的影响进而影响检测准确性。

综上所述，本领域迫切需要一种提高胶体金免疫层析平台检测临床准确度的方法，使得临床样本如血清、血浆、甚至全血检测在最大程度上削弱样本基质颜色的干扰，使临床检测更准确。

发明内容

本发明的目的就是提供一种提高胶体金免疫层析平台检测临床准确度的方法，使得临床样本如血清、血浆、甚至全血检测在最大程度上削弱样本基质颜色的干扰，使临床检测更准确。

在本发明的第一方面，提供了一种标准曲线的建立方法，其中，

所述的标准曲线是用于通过基于胶体金的定量分析方法对待测样本中待测目标进行定量分析的标准曲线；

且所述的建立方法包括步骤：

(1)提供校准品稀释液；

所述的校准品稀释液包括稀释溶剂和有色物质，且所述校准品稀释液中有色物质的用量由待测样本的背景值确定；

(2)用步骤(1)的校准品稀释液配置一系列校准品溶液；