[发明专利]一种提高去除人免疫球蛋白中IgA载量的层析工艺

权利要求书

1.一种提高去除人免疫球蛋白中IgA载量的层析工艺，对经低温乙醇法得到的二次沉淀组分进行分离提纯，其特征在于，包括以下步骤：

S1：对二次沉淀进行溶解并过滤，得到过滤液；

S2：调整过滤液的层析前参数，得到层析前溶液；

S3：对层析前溶液进行层析。

2.根据权利要求1所述的一种提高去除人免疫球蛋白中IgA载量的层析工艺，其特征在于，步骤S1具体如下：

P1：用相当于二次沉淀组分体积5～10倍的注射用水溶解二次沉淀组分，并在2～8℃下搅拌2～4小时得到溶解液；

P2：对溶解液进行过滤时，用终端为0.2μm滤芯过滤，得到过滤液。

3.根据权利要求2所述的一种提高去除人免疫球蛋白中IgA载量的层析工艺，其特征在于，步骤P2中，过滤时，过滤压力≤0.15MPa。

4.根据权利要求1所述的一种提高去除人免疫球蛋白中IgA载量的层析工艺，其特征在于，步骤S2具体如下：调整过滤液pH为5.70～5.90，蛋白浓度为10～30g/L，电导率不高于0.30ms/cm，得到层析前溶液。

5.根据权利要求4所述的一种提高去除人免疫球蛋白中IgA载量的层析工艺，其特征在于，配制1.0mol/L醋酸溶液，将1.0mol/L醋酸溶液以300～400ml/min加入过滤液中，调整过滤液pH为5.70～5.90；若pH低于5.70，用0.5mol/L氢氧化钠溶液调整；用低温注射用水或者平衡液调整蛋白浓度为10～30g/L，电导率不高于0.30ms/cm。

6.根据权利要求5所述的一种提高去除人免疫球蛋白中IgA载量的层析工艺，其特征在于，所述平衡液为0.0025mol/L的醋酸钠/醋酸缓冲液，pH为5.70-5.90。

7.根据权利要求1所述的一种提高去除人免疫球蛋白中IgA载量的层析工艺，其特征在于，所述层析包括凝胶前平衡、制品层析和凝胶后处理；层析前，先对凝胶进行冲洗平衡，平衡至凝胶的pH与层析前溶液的pH值差值为-0.10～0.10；依据层析前溶液的蛋白浓度，制品层析时按照不同的凝胶层析载量上样，上样至紫外起峰开始收集流穿液，上样结束后用平衡液2顶出层析柱里的制品；搅拌均匀的测量流穿液体积，取样检测蛋白浓度、pH和电导率；凝胶后处理时，用1.0-3cm/min的线性流速分别走洗脱液3-5倍柱床体积、凝胶CIP液3-5倍柱床体积、凝胶封存液3-5倍柱床体积，收集洗脱液，测量体积，取样检测蛋白含量，并留样。

8.根据权利要求7所述的一种提高去除人免疫球蛋白中IgA载量的层析工艺，其特征在于，对凝胶进行平衡包括：按1.5～3.0cm/min的线性流速分别用0.5mol/L氢氧化钠溶液走3～5倍柱床体积、平衡液1走3～5倍柱床体积、平衡液2走3～5倍柱床体积，平衡pH至制品上样pH值±0.10。

9.根据权利要求8所述的一种提高去除人免疫球蛋白中IgA载量的层析工艺，其特征在于，所述平衡液1为0.025mol/L醋酸钠/醋酸缓冲液，pH5.70～5.90；所述平衡液2为0.0025mol/L醋酸钠/醋酸缓冲液，pH5.70～5.90。

10.根据权利要求7所述的一种提高去除人免疫球蛋白中IgA载量的层析工艺，其特征在于，所述凝胶CIP液为0.5mol/L氢氧化钠、1.0mol/L氯化钠和20％乙醇的混合液，所述凝胶封存液为0.15mol/L氯化钠和20％乙醇的混合液。