[发明专利]一种能提高吖啶酯抗原抗体结合物稳定性并降低本底的稀释液及其制备方法

说明书

本发明提供了一种能提高吖啶酯抗原抗体结合物稳定性并降低本底的稀释液，所述稀释液包括以下成分：Tris‑base：5~7g；浓盐酸：3.5～4.0 mL；聚乙二醇‑6000：9~11g；10%十二烷基硫酸钠：0.95～1.05mL；吐温：9.5～10.5mL；乙二胺四乙酸二钠：0.8~1.0g；酪蛋白钠：9~11g；Proclin300：0.95～1.05mL；曲拉通X‑100：9.5～10.5mL；体外诊断试剂用纯化水，加至1000mL；本发明的优点在于成分少，聚乙二醇6000，十二烷基硫酸钠，吐温，几种活性剂混合使用，同时配合Tris‑base缓冲液体系，多种原料之间起到了相互增效和协同作用，使得稀释液对吖啶酯标记抗原抗体的保护效果更好，可长期保存，能为抗体提供良好的阻断性与保护性，降低非特异性反应；同时节约物料成本，且试剂的特异性、稳定性、重复性等性能不受影响，适合推广使用。

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域。

具体地说，是涉及一种能提高吖啶酯抗原抗体结合物稳定性并降低本底的稀释液及其制备方法。

背景技术

吖啶盐和相关化合物已被证明是非常有优势的化学发光标记物，稳定性，活性和敏感性超过了那些放射性同位素。吖啶酯能与任何含有氨基的蛋白发生反应，在碱性条件下，NHS将会离去，吖啶酯将会以一个稳定的酰胺键与蛋白质结合形成吖啶化合物。反应完成后，多余的吖啶盐通过脱盐柱除去。

在存在碱性过氧化氢，吖啶标记的蛋白不需要酶催化可自行发光。加入激发试剂后，体系立即释放光子，可以用430nm标准光度计检测。这个发光过程是十分短暂（整个过程的发生小于2秒），触发方案必须增加内部光度计和光子探测器。蛋白质，多肽，抗体，核酸都可以用吖啶标记。标记化合物在碱性过氧化氢的激发下快速发光，通过收集光子可以检测到标记化合物。

但是在具体实施过程中，吖啶酯抗原抗体结合物并没有想象的稳定，在一般的缓冲液中易水解，易出现试剂不稳定情况，在长期保存过程中，本底也通常很容易升高，由于保存稀释液效果不好，长期储存，保护性降低，因此非特异性结合升高，导致试剂在性能以及稳定性上会大打折扣。由于吖啶酯底物研发简单，成本较低，从目前的体外诊断试剂市场来看，吖啶酯作为发光物质已经是一种大趋势，因此研制一种合适的稀释液，至关重要。

发明内容

本发明的目的在于克服上述传统技术的不足之处，提供一种能提高吖啶酯抗原抗体结合物稳定性并降低本底的稀释液。

本发明的目的是通过以下技术措施来达到的：一种能提高吖啶酯抗原抗体结合物稳定性并降低本底的稀释液，所述稀释液包括以下成分：

Tris-base：5~7g；

浓盐酸：3.5～4.0 mL；

聚乙二醇-6000：9~11g；

10%十二烷基硫酸钠：0.95～1.05mL；

吐温：9.5～10.5mL；

乙二胺四乙酸二钠：0.8~1.0g；

酪蛋白钠：9~11g；

Proclin300：0.95～1.05mL；

曲拉通X-100：9.5～10.5mL；

体外诊断试剂用纯化水，加至1000mL。

作为一种改进，所述稀释液包括以下成分：

Tris-base：5.0g；

浓盐酸：3.5mL；

聚乙二醇-6000：9.0g；

10%十二烷基硫酸钠：0.95mL；

吐温：9.5mL；