[发明专利]一种提高烟草抗病性的水溶性多肽诱导剂及其应用

说明书

一种提高烟草抗病性的水溶性多肽诱导剂及其应用，所述诱导剂包括：15～25份水溶性多肽、50～70份溶剂、5～15份渗透剂、5～15份稳定剂，所述水溶性多肽提取自青霉菌灭活菌丝体；该水溶性多肽的制备方法为：将青霉菌灭活菌丝体用盐析法提取多肽粗提物，再将多肽粗提物经过三级分离和活性筛选得到所述水溶性多肽浓缩干燥样品，该水溶性多肽能诱导烟草抵抗烟草花叶病毒及烟草黑胫病病菌。本发明提取方法简单，并能对废物进行充分利用，效果佳，质量稳定。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种提高烟草抗病性的水溶性多肽诱导剂及其应用。

背景技术

植物自身即拥有抵御病原物和非生物胁迫的机制，分为固有抗性和诱导抗性。诱导抗性是植物在一定的诱导因子刺激下，对随后的病原菌侵染产生抵抗性的一种现象。这是利用植物自身的防卫体系来进行病害防治，克服了抗病育种年限长、抗病品种产量低、化学防治易造成环境污染和病菌的抗药性等诸多缺点。随着人们对这方面研究的加深，利用诱导抗性防治植物病害在可持续农业模式中越来越受重视。植物诱导抗病剂，又称激发子(Elicitor)，是可以诱导植物抗性的一系列物理、化学或生物源诱导因子的总称。这些物质可被植物识别为信号物质，诱发植物自身的免疫系统，最终使植物获得抵御病害的能力。因此，植物诱抗剂可称得上是植物的“疫苗”，对植物诱抗剂的研究与开发对可持续发展农业具有非常重要的意义。

现有技术中，多肽保与AHO2种诱导剂的组合应用对控制TMV有良好效果,能明显推迟带毒隐症烟株TMV的发病时间,移栽后70d对以清水和东旺毒消为对照的大田期烟株TMV的平均防效分别达到69.64％和43.25％。

青霉菌灭活菌丝体(Dry mycelium of Penicillium chrysogenum)是工业生产青霉素的残余副产物,是包含菌丝体、代谢物、发酵残余物的混合体，国家规定高温灭活后可排放。研究表明，青霉菌灭活菌丝体可以作为有机肥料促进作物生长，并且能够诱导植物产生抗病性，提高植物对多种病害的抵抗能力。然而，青霉菌灭活菌丝体成分复杂，以其直接作为诱导抗病剂虽然工艺简单，但由于其中有效物质未确定，因此无法以有效成分来准确定量，其作用的稳定性受到一定影响。开发青霉菌灭活菌丝体中具有稳定诱导抗病效果的成分作为植物诱抗剂，以实现有效、稳定、广谱的病害防治效果，在农业生产上具有重要意义。前人曾尝试利用亲和层析、离子交换层析、高效液相色谱等方法分离青霉菌灭活菌丝体中的有效成分，然而并未获得良好结果。针对青霉菌灭活菌丝体中的某一类物质进行分离和提取，或能达到更好的效果。青霉菌灭活菌丝体中含有一定量的多肽物质，其中的水溶性多肽可以稳定诱导植物产生系统抗病性。本发明提供了一种简便、快捷的办法提取青霉菌灭活菌丝体中的水溶性多肽，并将其制备为高效诱导抗烟草花叶病毒(TMV)抗病剂应用于农业生产。

发明内容

针对以上问题，本发明提供了一种简便、快捷的办法提取青霉菌灭活菌丝体中的水溶性多肽，并将其制备为高效诱导抗烟草花叶病毒(TMV)抗病剂应用于农业生产。

本发明采用的技术方案为，一种提高烟草抗病性的水溶性多肽诱导剂，所述诱导剂包括：15～25份水溶性多肽、50～70份溶剂、5～15份渗透剂、5～15份稳定剂，所述水溶性多肽提取自青霉菌灭活菌丝体。

优选地，所述溶剂为水，所述渗透剂为氨基磺酸钠或吐温，所述稳定剂为氨基酸碱类物质。

优选地，所述水溶性多肽的制备方法为：

a.将青霉菌灭活菌丝体用盐析法提取多肽粗提物：

1)将医药工业生产青霉素的固-液混合废弃残渣倒入预混池，按照残渣:硅藻土质量比为10:1～10：3的比例加入干燥的硅藻土，搅拌混合均匀；

2)将上述预混合料80℃～110℃鼓风干燥灭活0.5～2.5小时；

3)干燥后的混合料每50～100克用1升蒸馏水溶解，用八层纱布或双层棉布过滤除去不能溶解的残渣，将过滤得到的澄清液体倒入大烧杯；