[发明专利]一种苯乙醇苷含量提高的转基因植株及生产方法有效
申请号: | 201910048501.X | 申请日: | 2019-01-18 |
公开(公告)号: | CN109679991B | 公开(公告)日: | 2020-11-03 |
发明(设计)人: | 谢峻;汤宁;谷燕;夏灿;吴永军;李豪;徐祎;陈荣华;张坤灵 | 申请(专利权)人: | 马鞍山师范高等专科学校 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/00 |
代理公司: | 安徽知问律师事务所 34134 | 代理人: | 郭大美;闫飞 |
地址: | 243000 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 乙醇 含量 提高 转基因 植株 生产 方法 | ||
1.一种苯乙醇苷含量提高的转基因植株的生产方法,其特征在于:所述方法将 RgPAL1基因和 RgTyrDC 基因转入植株,获得转基因植株;所述RgPAL1 基因的GenBank号为AF401636;所述RgTyrDC 基因的GenBank号为KU640395;所述植株为红花钓钟柳。
2.根据权利要求 1 所述的苯乙醇苷含量提高的转基因植株的生产方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
1)分别获得地黄 RgPAL1 基因和 RgTyrDC 基因;
2)将步骤1)中的地黄 RgPAL1 基因和 RgTyrDC 基因连接于表达调控序列,分别形成含 RgPAL1 基因和 RgTyrDC 基因的植物表达载体;
3)将分别含 RgPAL1 基因和 RgTyrDC 基因的植物表达载体转化工程菌,获得含RgPAL1和 RgTyrDC 基因植物表达载体的工程菌菌株;
4)将步骤 3)中得到的工程菌菌株共转化的红花钓钟柳植株,获转基因植株;
5)验证步骤 4)中得到的转基因植株、测定转基因植株中的苯乙醇总苷含量,筛选苯乙醇总苷含量提高的植株。
3.根据权利要求 2 所述的苯乙醇苷含量提高的转基因植株的生产方法,其特征在于:所述方法还包括对转基因植株中的毛蕊花糖苷、松果菊苷、金石蚕苷进行定量分析,筛选毛蕊花糖苷、松果菊苷、金石蚕苷含量均提高的转基因植株。
4.根据权利要求 3 所述的苯乙醇苷含量提高的转基因植株的生产方法,其特征在于:所述工程菌为根癌农杆菌。
5.根据权利要求 2 或 3 所述的苯乙醇苷含量提高的转基因植株的生产方法,其特征在于:所述毛蕊花糖苷、松果菊苷、金石蚕苷的定量分析采用 HPLC-PDA 的方法,色谱柱为反相色谱柱。
6.根据权利要求 5 所述的苯乙醇苷含量提高的转基因植株的生产方法,其特征在于:所述毛蕊花糖苷、松果菊苷、金石蚕苷的定量分析前处理包括以下步骤:将植株于烘箱中烘至恒重,研磨成粉,过筛,取粉末加入甲醇、乙醇或正丁醇超声提取。
7.根据权利要求 4 所述的苯乙醇苷含量提高的转基因植株的生产方法,其特征在于:所述步骤 1)中的地黄 RgPAL1 基因和 RgTyrDC 基因采用基因克隆方法获得。
8.权利要求1 所述的苯乙醇苷含量提高的转基因植株的生产方法制备的植株的应用,其特征在于:所述植株用于制备抗氧化、美白、护肤、抗衰老、保肝、免疫调节、神经保护的药材或化妆品。
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