[发明专利]一种提高青花菜离体再生效率的组织培养方法

权利要求书

1.一种提高青花菜离体再生效率的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）外植体选择

取青花菜花球成熟期的外叶，灭菌处理，灭菌后，将叶片切成边长为1.0～1.5 cm的外植体方块；

（2）分化诱导

把外植体方块接种到诱导培养基上，置于温度为25±0.5 ℃的培养室中，每天光照时间为14h；

（3）继代增殖

将步骤（2）诱导产生的单芽或丛生芽，转接到继代增殖培养基上，25~30 d转接一次，光照培养环境为：白光，光照时间为14 h/d，培养温度为25±0.5 ℃；

（4）生根诱导

幼芽生长至3~4 cm高时，将其转接到生根培养基上；光照培养环境为：白光，光照时间为14 h/d，培养温度为25±0.5 ℃；

（5）移栽与定植

生根苗在室温下炼苗24h后，移植到穴盘中生长，基质为十字花科蔬菜育苗基质；待幼苗长到5~7片真叶定植到大田；

步骤（2）中，所述诱导培养基为MS+0.2 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA+6~7 g/L琼脂+25~30g蔗糖, pH5.8；

步骤（2）中，培养室中光照条件为白光灯：红光灯=3:1；

步骤（3）中，所述继代增殖培养基为MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+6~7 g/L琼脂+25~30 g蔗糖, pH5.8；

步骤（4）中，所述生根培养基为MS+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L IBA+7~8 g/L琼脂+20~25g蔗糖, pH5.8。

2.根据权利要求1所述的提高青花菜离体再生效率的组织培养方法，其特征在于，步骤(1)中，所述灭菌处理的方法如下：

采用体积分数75%的乙醇对叶片灭菌1~2 min，然后用体积分数8~9 %的次氯酸钠消毒15~20 min，最后用无菌水冲洗。