[发明专利]一种提高甲壳素酶表达量的方法有效
| 申请号： | 201811068554.X | 申请日： | 2018-09-13 |
| 公开（公告）号： | CN109097379B | 公开（公告）日： | 2020-08-04 |
| 发明（设计）人： | 刘龙;潘梦妍;吕雪芹;堵国成;李江华;陈坚 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N15/74;C12N9/24;C12N1/21 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 甲壳素 表达 方法 | ||
1.一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，所述方法为先将外源信号肽基因融合至切除了自身信号肽基因的甲壳素酶基因(chisb)N端；然后将融合有外源信号肽基因的甲壳素酶基因在表达宿主中进行表达；
所述外源信号肽为信号肽NprB、AmyE、AprE、BglS、Bpr、Epr、LipA、Vpr、YweA或YclQ；
所述表达宿主为枯草芽孢杆菌。
2.如权利要求1所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，所述方法为先将甲壳素酶基因的自身信号肽基因切除，得到缺失自身信号肽的甲壳素酶基因(chisb-sp)；然后将外源信号肽基因融合至缺失自身信号肽的甲壳素酶基因的N端，得到融合基因；然后将融合基因与表达载体相连接，得到重组载体；最后将重组载体转化至表达宿主中进行表达。
3.如权利要求1所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，编码所述外源信号肽的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9或SEQ ID NO.10。
4.如权利要求2所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，编码所述外源信号肽的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9或SEQ ID NO.10。
5.如权利要求1所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，所述甲壳素酶来源于Bacillus sp.DAU101。
6.如权利要求2所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，所述甲壳素酶来源于Bacillus sp.DAU101。
7.如权利要求3所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，所述甲壳素酶来源于Bacillus sp.DAU101。
8.如权利要求4所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，所述甲壳素酶来源于Bacillus sp.DAU101。
9.如权利要求1所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，编码所述甲壳素酶的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.11。
10.如权利要求2所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，编码所述甲壳素酶的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.11。
11.如权利要求3所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，编码所述甲壳素酶的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.11。
12.如权利要求4所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，编码所述甲壳素酶的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.11。
13.如权利要求5所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，编码所述甲壳素酶的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.11。
14.如权利要求6所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，编码所述甲壳素酶的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.11。
15.如权利要求7所述的一种提高甲壳素酶表达量的方法，其特征在于，编码所述甲壳素酶的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.11。
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