[发明专利]一种提高庆大霉素发酵单位及改变其组分组成的补料方法

说明书

本发明涉及一种提高庆大霉素发酵单位及改变其组分组成的补料方法，属于发酵工程领域，该方法是在经种子培养后的发酵培养过程中实施，在不同时间段共进行四次补料，每次补料补入补料培养基，从在100L发酵罐中发酵培养开始时计时，四次补入的时间及其补入量分别为：20‑24h补2.4‑4.2 L、35‑40h补2.4‑4.2 L、46‑50h补1.85‑3.25 L、55‑65h补1.85‑3.25 L；在发酵过程中适时补水以控制发酵液体积与初始发酵时一致。该补料方法使发酵效价明显提高、黏度降低、放罐发酵液滤速提高，而且各组分比例较为理想，同时工艺简单有效，染菌概率降低，适用于工业化生产。

技术领域

本发明属于发酵工程领域，具体涉及庆大霉素的发酵生产，特别是涉及一种提高庆大霉素发酵单位及改变其组分组成的补料方法。

背景技术

庆大霉素是由放线菌属绛红小单胞菌、棘孢小单胞菌等小单胞菌发酵产生的氨基糖苷类广谱抗生素，主要用于敏感菌所致的严重感染，如新生儿脓毒症、中枢神经系统感染、尿路感染、呼吸道感染、肺炎、胃肠道感染的等，在临床中具有广泛的应用。其中以C族复合物（C1、C2、C1a、C2a）为主，其主要作用的C族复合物由于在化学结构上的差异，生物活性和毒性也不相同。提高其发酵单位，改变其组分生成是目前研究工作中一个重要热点。

在范一文等公开发表的“间歇补料对小单孢菌产庆大霉素的影响”一文中，虽然通过改变补料方式，效价虽然有所提高，但是，也存在几个问题：其一： 其研究通过一直流加氨水维持发酵液的PH，在发酵初级代谢产酸阶段过多地引入铵离子，导致氨基氮水平在发酵过程中持续偏高，抑制菌丝由初级代谢转入次级代谢，从而致使庆大霉素发酵水平不能有效提高；其二：其研究单一的补入碳源，缺少有机氮源的引入；其三：其研究中基础发酵培养基碳氮源浓度较高，使得发酵前期由于营养基质浓度过高而抑制菌体生长，前期菌浓增长缓慢，同时抑制了次级代谢的有效进行，使发酵起步效价偏低。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的在于提供一种提高庆大霉素发酵单位及改变其组成成分的补料方法，通过优化庆大霉素的原始补料工艺，提高庆大霉素的发酵单位，优化组分组成，简化生产操作，降低生产成本，更易于工业化生产。

一种提高庆大霉素发酵单位及改变其组分组成的补料方法，其是在经种子培养后的发酵培养过程中实施，其中，在发酵培养过程中的四个时间段共进行四次补料，每次补料补入补料培养基，从在100L发酵罐中发酵培养开始时计时，四次补料补入的时间及其补入量分别为：20-24h补2400-4200mL、35-40h补2400-4200mL、46-50h补1850-3250mL、55-65h补1850-3250mL；

在发酵培养过程中适时补水以控制发酵罐内发酵液体积与初始发酵时一致。

进一步的，所述四次补料补入的时间及其补入量分别为：20-24h补3000-3500mL、35-40h补3000-3500mL、46-50h补2300-2700mL、55-65h补2300-2700mL。

进一步的，所述四次补料补入的时间及其补入量分别为：20-24h补2400-2800mL、35-40h补2400-2800mL、46-50h补1850-2150mL、55-65h补1850-2150mL。

进一步的，所述四次补料补入的时间及其补入量分别为：20-24h补3600-4200mL、35-40h补3600-4200mL、46-50h补2750-3250mL、55-65h补2750-3250mL。

进一步的，所述补料培养基中所含成分的浓度以g/100mL计，则所含成分及其浓度分别为：玉米淀粉为5.6-8.4、玉米粉为1.68-2.52、大豆蛋白胨为1.76-2.64、冷榨豆粉7.04-10.56、醋酸钠为0.2、硫酸铵为0.16、硝酸钾为0.034、碳酸钙为0.7、氯化钙为0.1、氯化钴为0.004 、淀粉酶为0.004、泡敌为0.03和有机硅油为0.02，PH 7.6。