[发明专利]一种提高短短芽孢杆菌细菌素生产水平的发酵方法

说明书

本发明公开了一种提高短短芽孢杆菌细菌素生产水平的发酵方法，先获取菌种，然后将获取的菌种接种到发酵培养基中进行发酵获得短短芽孢杆菌细菌素，根据菌体发酵开始后前6～18h的对数生长期和菌体发酵开始18h后至发酵结束的稳定期生长状况按照发酵时间进行分段调整。在短短芽孢杆菌细菌素发酵过程中按时间分段调控发酵体系的温度、溶氧、以及pH，通过以上参数的调整可使发酵前期菌种能够快速稳定的生长，发酵中后期菌种能够高效稳定的产细菌素，降低其它副产物的生成。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种提高短短芽孢杆菌细菌素生产水平的发酵方法。

背景技术

细菌素是某些细菌产生的具有抗菌活性的物质，主要成分为小分子多肽、蛋白质、酶、或蛋白质复合物，最早是由Jacob于1953年提出，后经Konisly进一步补充完善。近年来，种类繁多的抗生素在食品工业、动物生产、医疗、畜禽饲料等方面广泛使用的负面效应日益突出，寻找新型抗生素得到了研究者的足够重视，细菌素作为一种新型抗生素在抗菌方面，具有高效无毒、耐酸碱、耐高温、无残留、几乎无抗药性的特性，是极具潜力的传统抗生素替代品。目前除了商业化生产的细菌素Nisin外、其它的细菌素还处在试验及临床研究阶段，其主要受限于细菌素的制备成本高，产量较低，产量不稳定。上述问题在较大的程度限制了各类细菌素的鉴定及开发利用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足，提供一种提高短短芽孢杆菌细菌素生产水平的发酵方法，用于高效生产短短芽孢杆菌细菌素。

本发明采用以下技术方案：

一种提高短短芽孢杆菌细菌素生产水平的发酵方法，先获取菌种，然后将获取的菌种接种到发酵培养基中进行发酵获得短短芽孢杆菌细菌素，根据菌体发酵开始后前6～18h的对数生长期和菌体发酵开始18h后至发酵结束的稳定期生长状况按照发酵时间进行分段调整。

优选的，所述获取菌种具体为：将发酵菌种短短芽孢杆菌接种到种子培养基中29～31℃培养12～16h得种子液。

优选的，所述种子培养基包括葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、磷酸二氢钾和Tween-20，所述葡萄糖的质量百分含量为0.5％，所述蛋白胨的质量百分含量为1.2％、牛肉膏的质量百分含量为0.65％，氯化钠的质量百分含量为0.4％，磷酸二氢钾的质量百分含量为0.14％、Tween-20的质量百分含量为0.1％，所述种子培养基的pH为7.2。

优选的，所述发酵具体为：将产短短芽孢杆菌细菌素的菌种种子液按照体积比为2:25～3:50比例接种到发酵培养基中进行短短芽孢杆菌细菌素发酵。

优选的，在发酵开始后的前6～18h内发酵体系温度调整为29～31℃，发酵开始18h后至发酵结束发酵体系温度调为27～29℃。

优选的，在发酵开始后的前6～18h内发酵体系中溶氧调高为60％～80％，发酵开始18h后至发酵结束发酵体系溶氧调低为40％～60％。

优选的，在发酵开始后的前6～18h内发酵体系pH调整为7.3～7.5，发酵开始18h后至发酵结束发酵体系pH调整为6.8～7.2。

优选的，所述发酵培养基按质量百分含量包括马铃薯淀粉2％、豆饼粉3％、氯化钙0.20％、磷酸氢二钾0.025％、吐温-20 0.8％和吐温-80 0.2％，所述发酵培养基的pH为6.8。

优选的，所述菌种为BNCC138469短短芽孢杆菌。

与现有技术相比，本发明至少具有以下有益效果：