[发明专利]一种鱼卵、仔稚鱼分类鉴定的方法在审
| 申请号： | 201710086342.3 | 申请日： | 2017-02-17 |
| 公开（公告）号： | CN106834473A | 公开（公告）日： | 2017-06-13 |
| 发明（设计）人： | 朱书礼;李新辉;杨计平;李捷;李跃飞;武智;帅方敏 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院珠江水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京华仁联合知识产权代理有限公司11588 | 代理人： | 覃红丽 |
| 地址： | 510380 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鱼卵 仔稚鱼 分类 鉴定 方法 | ||
1.一种鱼卵、仔稚鱼分类鉴定的方法，包括以下步骤：
(1)采集调查水域的成鱼样本，并对成鱼样本进行分类鉴定，将已分类鉴定的各种鱼类提取DNA，并对COⅠ序列分别进行PCR扩增测序，据此建立该调查水域鱼类的COⅠ序列数据库；
(2)将调查采集到的鱼卵、仔稚鱼样本编号，用相同方法对鱼卵、仔稚鱼COⅠ序列进行扩增测序；
(3)将鱼卵、仔稚鱼COⅠ序列测序结果与已建立的COⅠ序列数据库进行比对分析，从而鉴定鱼卵、仔稚鱼的种类。
2.根据权利要求1所述的一种鱼卵、仔稚鱼分类鉴定的方法，其特征在于：步骤(1)中所述DNA提取方法为：取成鱼新鲜肌肉或鳍条组织，用无水乙醇固定，蛋白酶K消化，酚-仿常规方法抽提DNA，-20℃保存备用。
3.根据权利要求1所述的一种鱼卵、仔稚鱼分类鉴定的方法，其特征在于：COⅠ序列通用扩增引物为：Forward primer：5-TCAACCAACCACAAAGACATTGGCAC-3，Reverse primer：5-TAGACTTCTGGGTGGCCAAAGAATCA-3。
4.根据权利要求1所述的一种鱼卵、仔稚鱼分类鉴定的方法，其特征在于：所述的PCR扩增反应体系为：95℃预变性3分钟；每一个循环94℃30秒，56℃30秒，72℃50秒，共30个循环；最后72℃延伸6分钟；PCR产物经1％琼脂糖凝胶电泳检测后，用纯化试剂盒回收，测序。
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