[发明专利]利用两轮加菌共培养提高小球藻产量的方法和制备生物饲料的方法

说明书

本发明公开了一种利用两轮加菌共培养提高小球藻产量的方法和制备生物饲料的方法，包括：1)将第一次加入的水稻内生泛菌和小球藻在光照下进行第一轮菌藻共培养，培养结束后，得到第一轮菌藻共培养液；2)在第一轮菌藻共培养液中再补加第二次加入的水稻内生泛菌，在光照下进行第二轮菌藻共培养，培养结束后，得到第二轮菌藻共培养液；3)对第二轮菌藻共培养液进行细胞分离，得到小球藻细胞沉淀和内含水稻内生泛菌的上清菌液。本发明中，蛋白核小球藻活细胞沉淀经洗涤重悬后可作为水中偶氮染料降解等污水净化处理的生物基料，也可经干燥后获得小球藻细胞干品，作为制备饲料、提取油脂、蛋白、色素和生长因子等相关生物产品的原料。

技术领域

本发明涉及微生物和生物技术领域，具体涉及一种利用两轮加菌共培养提高小球藻产量的方法和制备生物饲料的方法。

背景技术

小球藻是一种单细胞绿藻，其环境适应性强，易于大规模培养，细胞中含有丰富的营养物质，广泛应用于保健食品、饲料、食品添加剂、精细化加工品和作为医药制剂原料，其开发利用已经引起国内外广泛的重视。我国常见的小球藻种类有蛋白核小球藻、椭圆小球藻、普通小球藻等，其中蛋白核小球藻藻粉粗蛋白核必需氨基酸含量高，是一种优良的饲料蛋白源(李国平.蛋白核小球藻粉中氨基酸含量和饲用价值分析.中国野生植物资源.2003，22(2):23-25)。蛋白核小球藻还可以清除废水中不同形态的氮和磷，可用于工厂化水产养殖废水的净化处理(陈海敏等，工厂化水产养殖废水菌藻联合处理模式研究.浙江树人大学学报，2002，2(4)：64-67)，还能利用偶氮染料为唯一氮源和碳源生长，对印染废水中的偶氮染料具有较强的脱色能力(郑金来等，生物降解常见染料的研究进展.环境污染治理技术与设备，2000，1(3):39-43)。因此，如何在提高细胞生长速率，短时间内获得大量的藻细胞是开发应用蛋白核小球藻的关键技术环节。

已有研究表明微藻和微生物之间存在从寄生到共生等广泛的互作现象，某些微生物对藻细胞的生长代谢影响显著，能促进藻细胞生长和生化组分的积累[Ueda H,etal.Bacterial communities constructed in artificial consortia of bacteria andChlorella vulgaris.Microbes Environment,2010,25(1):36-40.]。植物内生菌是能够定殖在健康植物内，并与宿主植物建立和谐共生关系的一类微生物。水稻植株含有许多内生微生物，是重要的内生细菌资源，来源于水稻植株的内生泛菌可以显著促进宿主水稻的生长，提高其生物量、叶绿素及磷含量的生物学作用(FengY,et al.Rice endophyte PantoeaagglomeransYS19promotes hostplant growth and affects allocations ofhostphotosynthates.Journal ofApplied Microbiology,2006,100(5):938-945.刘佳,等.内生成团泛菌HAUM1对宿主水稻的定殖及促生作用.湖北农业科学,2011,50(23):4820-4824.)。由于小球藻与植物细胞一样具有叶绿体，能够进行光合作用，其生化代谢特征与植物具有相似性，理论上，对植物具有代谢调节作用的植物内生菌也能影响小球藻的生长和代谢活动，但迄今国内外未见采用包括水稻内生菌在内的植物内生菌促进小球藻生长及生化组分合成积累的技术研究和应用。

发明内容

本发明提供了一种利用两轮加菌共培养提高小球藻产量的方法和制备生物饲料的方法，应用水稻内生泛菌进行两轮菌藻共培养，达到快速增加小球藻生长速率的目的效果。

一种利用两轮加菌共培养提高小球藻产量的方法，包括：

1)将第一次加入的水稻内生泛菌和小球藻在光照下进行第一轮菌藻共培养，培养结束后，得到第一轮菌藻共培养液；

2)在第一轮菌藻共培养液中再补加第二次加入的水稻内生泛菌，在光照下进行第二轮菌藻共培养，培养结束后，得到第二轮菌藻共培养液；