[发明专利]一种提高大豆分离蛋白水解产物中αα＇亚基的方法

说明书

技术领域

本发明属于食品加工技术领域，具体涉及一种提高大豆分离蛋白水解产物 中αα′亚基含量的方法。

背景技术

大豆是全世界主要的油料作物和人类最经济的蛋白质来源之一，同时是世 界贸易中重要战略物质。大豆蛋白作为大豆中的最主要成分，含量达到了 30～50％。大豆蛋白主要由大豆球蛋白(11S)和β-大豆伴球蛋白(7S)组成。 大豆球蛋白是由酸性亚基A和碱性亚基B构成，β-大豆伴球蛋白是由α′、α和β 三个亚基构成的。天然大豆蛋白具有较好的乳化性、凝胶性、持水性、持油性 等功能性质。对大豆蛋白进行改性处理，可以进一步改善其功能特性，从而拓 宽其应用范围和提高其具体的实用价值。

酶解改性技术经常应用在蛋白质改性领域，酶解改性是利用蛋白酶的外切 或内切作用，将蛋白质降解成多肽、寡肽以及分子量更小的氨基酸的过程。选 择性酶解技术是从近几年才开始逐渐兴起和趋于成熟的酶解方法，这种技术的 核心在于可以只选择性地水解掉一部分蛋白亚基，而留下研究者想留下的蛋白 亚基。在大豆蛋白亚基制备方面，目前主要是采用变性剂脲和还原剂β-巯基乙 醇先解聚大豆蛋白，在还原条件下通过DEAE琼脂糖凝胶F阴离子交换层析 分离纯化大豆蛋白亚基，并对制备的亚基进行复性，从而制备出大豆蛋白亚基 的方法。各项研究表明，大豆α′亚基具有显著降低胆固醇和甘油三酯血浆水平 的功效；同时，α、α′亚基加热后易形成可溶性聚集体，样品中α亚基含量越高， 其水溶性和乳化性越好。但是上述应用柱层析分离纯化大豆蛋白亚基的方法具 有成本高、时间长、产率低等缺陷。

发明内容

选择性酶解的方法是21世纪初才开始兴起和正在发展完善的方法，该方 法具有成本低、时间短、得率高、安全无污染等优点，而且产品可直接应用于 食品或药品等领域，故本发明要解决的技术问题是如何克服现有技术的上述缺 陷，提供一种提高大豆蛋白水解产物中αα′亚基含量的方法。

为解决上述技术问题，本提高大豆分离蛋白水解产物中αα’亚基的方法包 括以下工艺步骤：

步骤(1)溶解——将大豆分离蛋白加入到反应容器中，添加蒸馏水，调 整至溶液状态，调整pH至2.0～2.5，即得大豆分离蛋白溶液；

步骤(2)酶解——对步骤(1)制得的大豆分离蛋白溶液进行酶解处理， 即得大豆分离蛋白酶解液；

步骤(3)分离——步骤(2)酶解完毕后，对步骤(2)制得的大豆分离 蛋白酶解液进行灭酶，将灭酶后的大豆分离蛋白酶解液冷却至25～28℃，调整 该酶解液的pH值至4.5，离心，收集沉淀，即得大豆分离蛋白水解产物沉淀；

步骤(4)纯化——将步骤(3)制得大豆分离蛋白水解产物沉淀添加蒸馏 水复溶，调整pH至6.5～8.0，然后进行冷冻干燥或喷雾干燥，即得。

作为优化方案，以重量份计，步骤(1)所述大豆分离蛋白与蒸馏水添加 量的比例为1∶11.5～99；pH值调整试剂为2mol/L的盐酸。

作为优化方案，步骤(2)所述酶解处理的具体方法为，以重量份计，将 酶活为3900units/mg的胃蛋白酶与大豆分离蛋白按照2.5∶100的比例配成溶液， 在pH＝2.0～2.5、反应温度35～40℃的调节下，酶解反应35～45min。

作为优化方案，步骤(3)所述灭酶的具体方法为，将步骤(2)制得的大 豆分离蛋白酶解液的pH值自调整至6.5～8.0，于90～100℃水浴中保温5～20min； 步骤(3)所述离心步骤的离心力为5000～10000g，离心时间为10～20min。

作为优化方案，以重量份计，步骤(4)所述大豆分离蛋白水解产物沉淀 与蒸馏水添加量按照1∶9～99的比例配成溶液，pH值调整试剂为2mol/L的 NaOH；步骤(4)所述冷冻干燥条件为，物料的厚度为45mm、预冻温度为-45℃、 预冻时间为2h、冻干温度为-25℃、冻干时间为24h、解吸温度为35℃、解吸 时间为10h；步骤(4)所述喷雾干燥条件为，气体压力为0.1MPa、进风温度 为180℃、出风温度为70℃。

上述大豆分离蛋白为山东临邑禹王植物蛋白有限公司购得，蛋白质含量为 89.8％，氮溶解指数为66.1％；胃蛋白酶为美国SIGMA公司，酶活为 3900units/mg。

本提高大豆分离蛋白水解产物中αα'亚基的方法与现有技术相比有以下优 点和有益效果：