[发明专利]一种提高乳酸菌制剂热稳定性的方法

说明书

本发明公开了一种提高乳酸菌制剂热稳定性的方法，采用鱼溶浆为营养源，乳酸菌发酵过程中采用程序性变温控制，其方法是：在乳酸菌发酵周期中，至少采用2次升温热激发酵处理，两次升温热激发酵的时间间隔为2～5hr，且每次热激处理时间为10～30min，热激发酵温度比正常发酵温度高3～10℃，发酵结束收获菌体干燥处理；所述正常发酵温度为35～42℃。本发明方法可以大幅度提高乳酸菌干燥粉剂的热稳定性。

技术领域

本发明涉及乳酸菌，特别是涉及一种提高乳酸菌制剂热稳定性的方法，主要用于乳酸菌粉剂制品延长货架期。

背景技术

乳酸菌(lactic acid bacteria，LAB)是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的通称。这类细菌在自然界分布极为广泛，具有丰富的物种多样性。它们不仅是研究分类、生化、遗传、分子生物学和基因工程的理想材料，在理论上具有重要的学术价值，而且在工业、农牧业、食品和医药等与人类生活密切相关的重要领域应用价值也极高。

乳酸菌制剂的生产，通常是采用冷冻干燥法制得冻干粉，也有少数耐热菌株可以采用喷雾干燥法生产。对于大多数乳酸菌制剂，都对高温敏感，即使常温保存，也存在快速失活的问题。乳酸菌制剂的常温难保存的问题对乳酸菌在食品和饲料中的添加、流通等带来了很大限制，制约了乳酸菌的广泛应用。为解决乳酸菌的稳定保存问题，人们开发了一系列保护剂。冻干保护剂就是一种非常常用的乳酸菌保护物质，其一般是由奶粉、海藻糖、多元醇等物质复合而成，其一方面可以减少乳酸菌在冻干过程中的损失，另一方面，可以提高乳酸菌的热稳定性。

热激处理是提高菌体稳定性的另一类重要方法，热激处理是在乳酸菌发酵过程中突然升温保持一段时间，从而提高了微生物的热稳定性。一般认为，此情况下，微生物的热稳定性的提高和热激蛋白的产生有关。热激蛋白(Heat Shock Protein，HSP)是在高低温、激素、高盐、干旱、缺氧及机械损伤等多种环境胁迫下生物体内正常蛋白收到抑制而诱导合成的新的或功能增强的应激蛋白，又被称为热休克蛋白。热激蛋白最早是在1962年，由Riotossa在果蝇上发现，至今，已经在几乎所有的动植物、微生物体内发现热激蛋白的合成。采用热激方法也是微生物制剂生产中一种常用的提高菌体热稳定性的方法。尽管已经开发了一系列提高乳酸菌热稳定性的方法，但乳酸菌制剂的热稳定性仍有待进一步提高。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明旨在开发一种新型提高乳酸菌制剂热稳定性的方法，显著提高乳酸菌制剂的热稳定性。

发明人课题组研究发现，发酵工艺的改变对于乳酸菌制剂冻干存活率、冻干粉稳定性等均具有重要影响，包括发酵培养基、培养温度、发酵周期等参数是重要影响因素，其中，发酵温度是影响最为显著的因素，且发现，发酵温度和培养基组成间存在交互作用关系。采用合适的发酵培养基和发酵条件，可以显著提高乳酸菌制剂的热稳定性。鱼抽提物为是鱼粉生产时所副产的鱼汤经油脂分离和浓缩而得到的产物。鱼抽提物是采用鱼体生产的一种复合营养物，其一般的生产方法是将蒸煮后的鱼挤压获得富含可溶性组分的液体，然后浓缩标准化所得到的一种产物。

本发明在利用鱼溶浆作为培养基研究乳酸菌制剂稳定性时，意外地发现采用鱼溶浆作为乳酸菌的营养源，并且采用至少2次升温热激的发酵工艺，可以获得更高稳定性的乳酸菌制剂。

本发明目的通过如下技术方案实现：

一种提高乳酸菌制剂热稳定性的方法，采用鱼溶浆为营养源，乳酸菌发酵过程中采用程序性变温控制，其方法是：在乳酸菌发酵周期中，至少采用2次升温热激发酵处理，两次升温热激发酵的时间间隔为2～5hr，且每次热激处理时间为10～30min，热激发酵温度比正常发酵温度高3～10℃，发酵结束收获菌体干燥处理；所述正常发酵温度为35～42℃。