[发明专利]一种利用代谢基因工程提高硅藻油脂含量的方法在审
| 申请号： | 201510674424.0 | 申请日： | 2015-10-16 |
| 公开（公告）号： | CN105219649A | 公开（公告）日： | 2016-01-06 |
| 发明（设计）人： | 姜鹏;郭扬;赵瑾;陈华新 | 申请（专利权）人： | 南通中国科学院海洋研究所海洋科学与技术研究发展中心;中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N1/13 | 分类号： | C12N1/13;C12N15/82;C12N15/54;C12P7/64 |
| 代理公司： | 苏州华博知识产权代理有限公司 32232 | 代理人： | 何蔚 |
| 地址： | 226004 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 代谢 基因工程 提高 硅藻 油脂 含量 方法 | ||
1.一种利用代谢基因工程技术提高硅藻油脂含量的方法，其特征在于，将硅藻中的甘油-3-磷酸酰基转移酶作为硅藻油脂代谢基因工程调控的靶点，克隆硅藻甘油-3-磷酸酰基转移酶基因，构建表达载体，再导入硅藻细胞，经筛选和检验获得油脂含量提升的转化藻株。
2.按权利要求1所述的利用代谢基因工程技术提高硅藻油脂含量的方法，其特征在于，所述方法具体步骤为：
1)克隆硅藻甘油-3-磷酸酰基转移酶基因，利用cDNA序列构建酵母表达载体；
2)利用酵母甘油-3-磷酸酰基转移酶突变体的回复突变验证该基因功能；
3)构建硅藻表达载体，导入硅藻细胞，经筛选和检验获得油脂含量提升的转化藻株。
3.按权利要求2所述的利用代谢基因工程技术提高硅藻油脂含量的方法，其特征在于，所述克隆硅藻甘油-3-磷酸酰基转移酶基因的引物是F1：5’-ATGGCGATGCGAGCCGTCAA-3’和R1：5’-TCACTTGGGTTTGTTTGGAT-3’。
4.按权利要求2所述的利用代谢基因工程技术提高硅藻油脂含量的方法，其特征在于，所述构建酵母表达载体时的引物是F2：5’-AATCTAGAATGGCGATGCGAGCCGTC-3’，带XbaI位点和R2：5’-GCGGTACCTCACTTGGGTTTGTTTGGATC-3’，带KpnI位点。
5.按权利要求2所述的利用代谢基因工程技术提高硅藻油脂含量的方法，其特征在于，所述构建硅藻表达载体时的引物是F3：5’-CGAGCTCATGGCGATGCGAGCC-3’与R3：5’-CGAGCTCTCACTTGGGTTTGTTTG-3’。
6.按权利要求2所述的利用代谢基因工程技术提高硅藻油脂含量的方法，其特征在于，所述导入硅藻细胞的导入方法为电激法或基因枪法。
7.按权利要求2所述的利用代谢基因工程技术提高硅藻油脂含量的方法，其特征在于，所获得的工程硅藻的转化藻株用于放大培养并提取油脂。
8.按权利要求1所述的利用代谢基因工程技术提高硅藻油脂含量的方法，其特征在于，所述硅藻表达载体包含作为基因表达调控元件的硅藻内源启动子、终止子，以及除草剂草丁膦抗性基因。
9.按权利要求1所述的利用代谢基因工程技术提高硅藻油脂含量的方法，其特征在于，所述硅藻为产油海洋硅藻三角褐指藻(Phaeodactylumtricornutum)、小环藻(Cyclotellasp.)。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南通中国科学院海洋研究所海洋科学与技术研究发展中心;中国科学院海洋研究所，未经南通中国科学院海洋研究所海洋科学与技术研究发展中心;中国科学院海洋研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201510674424.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
