[发明专利]一种提高羊肚菌胞外多糖含量的培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及食用菌培养技术领域，具体涉及一种提高羊肚菌胞外多糖含量的培养方法。

背景技术

羊肚菌(Morehellaesculenta(L.)Pers.)，又名羊肚蘑、羊肚菜等，是极为珍稀的食药两用真菌，属盘菌目(Pezizales)，羊肚菌科(Morchellaceae)，羊肚菌属(Morchella)。羊肚菌分布于我国陕西、甘肃、青海、西藏、新疆、云南等地区,羊肚菌是一种野生名贵食药用真菌，中医认为，其性平，昧甘寒，无毒，具有益肠胃、消化助食、化痰理气、补肾、壮阳、补脑、提神之功能羊肚菌营养丰富，其含丰富的蛋白质、碳水化合物、多种维生素及20多种氨基酸。羊肚菌的营养成分，可与牛乳、肉和鱼粉相当，被称为“健康营养食品”羊肚菌既是宴席上的珍品，又是久负盛名的食补良品，一直被公认为是高级营养滋补佳品。现代研究发现，羊肚菌具有很高的营养和药用价值，特别是羊肚菌多糖有降血脂、调节免疫功能、抗疲劳、抗辐射、抗肿瘤等作用，并能减轻癌症患者放化疗引起的毒副作用。羊肚菌在口感上更加细腻、滑嫩。但目前人们对野生资源的认识不够，对羊肚菌资源的开发利用存在不合理性，而且在开发利用过程中采取了掠夺性开采，导致野生资源遭受了破坏而匮乏。而羊肚菌子实体又对生长环境以及繁殖条件的要求十分严格，因此，开发人工栽培是解决羊肚菌供不应求的出路。专利CN103141308B公开了一种“小麦套作羊肚菌人工仿生栽培的方法”该发明包括制种、做畦、接种与覆土、发菌管理补充营养液、出菇管理。实现了生产成本低，产量稳定，产品品质好，出菇率高的目标。专利CN103190292B公开了一种“粗腿羊肚菌的林下栽培方法”该发明提供了一种在林下栽培粗腿羊肚菌，使粗腿羊肚菌的栽培范围扩大，提高粗腿羊肚菌产量和质量的方法，从根本上解决了天然粗腿羊肚菌产量低的问题。但是以上发明技术均未涉及提高羊肚菌多糖的含量。

发明内容

本发明的目的是对于现有技术的不足，提供一种提高羊肚菌胞外多糖含量的培养方法，从根本上提升了羊肚菌的营养价值。

本发明上述目的是通过如下技术方案实现的:

1、菌株采集：采于甘肃省陇南市某县阔叶林地的羊肚菌(Morehellaesculenta(L.)Pers)；

2、菌种组织分离：将采到的新鲜羊肚菌子实体用蒸馏水冲洗3-5遍,每次持续2-3min，75％酒精置于0.1％的HgCl₂溶液中浸泡1-2min,无菌水冲洗3-5次,无菌纱布吸干表面水分,在无菌条件下,从菌盖和菌柄连接处内侧切取直径为1cm的组织,接入PDA培养基,10℃培养8d,后切取菌丝尖端转管培养,直至获得野生纯羊肚菌菌种；

3、母种培养：将野生纯羊肚菌菌种接种于锥形烧瓶内的腐殖质土壤浸出液培养基上，重复接种3次，于20-25℃条件下培养，培养8-10天，菌丝长满瓶，备用；

4、原种培养：将装入原种培养基的玻璃瓶经120℃(0.2KPa)条件下灭菌1h,待冷却后无菌操作接入母种,置于培养箱18-20℃培养，培养30-50天，菌丝布满瓶内壁，放在阴凉处待用；

5、出菇培养：将长满菌丝的原种培养瓶置于20-22℃室温条件下培养，经30-40天产生子实体。

所述的腐殖质土壤浸出液培养基：腐殖质土壤浸出100-300ml，菌材浸出液50-100ml，子实体浸出液50-100ml、葡萄糖3.0-5.0g、磷酸二氢钾0.3-0.5g、硫酸镁0.1-0.5g、尿素0.1-0.5g、石膏粉0.5-1.0g、琼脂5.0-10.0g。

所述的腐殖质土壤浸出液培养基进一步优选为：腐殖质土壤浸出200ml，菌材浸出液60ml，子实体浸出液60ml、葡萄糖3.0g、磷酸二氢钾0.3g、硫酸镁0.2g、尿素0.2g、石膏粉0.6g、琼脂6.0g。

所述的土壤浸出液配制方法：种植土壤200g，加蒸馏水300ml，煮沸过滤加水至200ml。

所述的菌材浸出液制法：羊肚菌菌材50g，加蒸馏水250ml，煮沸过滤加水至200ml。

所述的羊肚菌子实体浸出液制法：子实体50g，加水200ml。煮沸过滤加水至100ml。

所述的羊肚菌原种培养基：棉籽壳80％、米糖5％、石膏2％、石灰2％，腐殖质土4％、过磷酸钙2％。

采用本发明技术方法培养的羊肚菌经超声波提取后测得羊肚菌多糖含量高于75.6％。超声波提取功率为400w、提取时间1h、提取温度为60℃、料液比1:10。