[发明专利]一种提高羊肚菌胞外多糖含量的培养方法

权利要求书

1.一种提高羊肚菌胞外多糖含量的培养方法，其特征在于包括以下步骤：

1)、菌株采集：采于甘肃省陇南市某县阔叶林地的羊肚菌(Morehellaesculenta(L.)Pers)；

2)、菌种组织分离：将采到的新鲜羊肚菌子实体用蒸馏水冲洗3-5遍,每次持续2-3min，75％酒精置于0.1％的HgCl2溶液中浸泡1-2min,无菌水冲洗3-5次,无菌纱布吸干表面水分,在无菌条件下,从菌盖和菌柄连接处内侧切取直径为1cm的组织,接入PDA培养基,10℃培养8d,后切取菌丝尖端转管培养,直至获得野生纯羊肚菌菌种；

3)、母种培养：将野生纯羊肚菌菌种接种于锥形烧瓶内的腐殖质土壤浸出液培养基上，重复接种3次，于20-25℃条件下培养，培养8-10天，菌丝长满瓶，备用；

4)、原种培养：将装入原种培养基的玻璃瓶经120℃(0.2KPa)条件下灭菌1h,待冷却后无菌操作接入母种,置于培养箱18-20℃培养，培养30-50天，菌丝布满瓶内壁，放在阴凉处待用；

5)、羊肚菌出菇培养：将长满菌丝的原种培养瓶置于20-22℃室温条件下培养，经30-40天产生子实体。

2.根据权利要求1所述的一种提高羊肚菌胞外多糖含量的培养方法，其特征在于：腐殖质土壤浸出液培养基：腐殖质土壤浸出100-300ml，菌材浸出液50-100ml，子实体浸出液50-100ml、葡萄糖3.0-5.0g、磷酸二氢钾0.3-0.5g、硫酸镁0.1-0.5g、尿素0.1-0.5g、石膏粉0.5-1.0g、琼脂5.0-10.0g。

3.根据权利要求2所述的一种提高羊肚菌胞外多糖含量的培养方法，其特征在于：腐殖质土壤浸出液培养基为：腐殖质土壤浸出200ml，菌材浸出液60ml，子实体浸出液60ml、葡萄糖3.0g、磷酸二氢钾0.3g、硫酸镁0.2g、尿素0.2g、石膏粉0.6g、琼脂6.0g。

4.根据权利要求2或3所述的一种提高羊肚菌胞外多糖含量的培养方法，其特征在于：土壤浸出液配制方法：种植土壤200g，加蒸馏水300ml，煮沸过滤加水至200ml。

5.根据权利要求2或3所述的一种提高羊肚菌胞外多糖含量的培养方法，其特征在于：菌材浸出液配制方法：羊肚菌菌材50g，加蒸馏水250ml，煮沸过滤加水至200ml。

6.根据权利要求2或3所述的一种提高羊肚菌胞外多糖含量的培养方法，其特征在于：羊肚菌原种培养基：棉籽壳80％、米糖5％、石膏2％、石灰2％，腐殖质土4％、过磷酸钙2％。

7.根据权利要求1所述的一种提高羊肚菌胞外多糖含量的培养方法，其特征在于：经超声波提取后测的羊肚菌胞外多糖含量高于76.5％。

8.根据权利要求7所述的一种提高羊肚菌胞外多糖含量的培养方法，其特征在于：超声波提取功率为400w、提取时间1h、提取温度为60℃，料液比为1:5。