[发明专利]一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法

权利要求书

1.一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法，其特征在于：其包括以下步骤：

1) 提取：将罗汉果原料进行破碎处理，再将破碎后的原料与体积浓度为30-35%的乙醇按重量比1：9-10混合均匀，在温度70-75℃下，提取45-60min，过滤，得到含有罗汉果甜甙V的提取液，并将提取液冷却至25-30℃；

2) 预浓缩：将上述冷却后的提取液浓缩至提取液体积的1/5-1/4，得到浓缩液；

3) 酶解：在上述浓缩液中加入酸溶液调节浓缩液pH至4.0-4.5，然后加入Brewers Compass 复合酶，所述复合酶的添加量为浓缩液重量的0.5-1‰，然后升温至50-55℃，酶解30-40min；

4) 一次过滤：将上述酶解后的浓缩液离心，采用1-2um的陶瓷膜过滤，得到一次滤液；

5）树脂吸附、洗脱：将大孔吸附树脂装入吸附柱中，然后将上述一次滤液以2-3BV/h的流速流过吸附柱进行吸附，吸附结束后用吸附柱体积3-4倍洗脱液洗脱，所述洗脱液为浓度70-75%的乙醇，洗脱流速为1-2BV/h，收集洗脱液；

6）浓缩、二次过滤：将上述收集的洗脱液浓缩至百利度为25-30%的浓缩液，再将浓缩液经1-2um陶瓷膜过滤，得到二次滤液；

7）树脂柱脱盐：采用D280大孔树脂为脱盐树脂，将其装入树脂柱中，将上述二次滤液以1.5-2BV/h的流速流过树脂柱，并收集流出液，然后用浓度70-75 %的乙醇为洗脱液进行洗脱并收集洗脱液，洗脱液用量为D280大孔树脂体积的2.0-2.2倍，合并流出液和洗脱液；

8）树脂柱脱色：采用D392大孔树脂为脱色树脂，将其装入树脂柱中，将上述合并后的流出液和洗脱液以1.5-2BV/h的流速流过树脂柱，进行脱色得到脱色液；

9）活性炭脱色：在上述脱色液中加入其重量5-8%的活性炭，在温度45-50℃下脱色50-60min，然后离心，弃沉淀，收集离心液；

10）灭菌、干燥：将上述离心液灭菌、干燥，得到含高纯度罗汉果甜甙V的罗汉果甜苷。

2.根据权利要求1所述的一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法，其特征在于：步骤1）所述的罗汉果原料为成熟的鲜罗汉果或干罗汉果。

3.根据权利要求2所述的一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法，其特征在于：所述干罗汉果的水分含量小于10%。

4.根据权利要求3所述的一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法，其特征在于：所述干罗汉果的制备方法如下：将新鲜的罗汉果在温度45-50℃下烘烤12-14 h，然后升温至65-70℃，烘烤22-24h，再降温至50-55℃，烘烤至水分含量小于10%，得到干罗汉果。

5.根据权利要求1所述的一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法，其特征在于：步骤2）和步骤6）中所述的浓缩均为真空浓缩。

6.根据权利要求1所述的一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法，其特征在于：步骤3）所述酸溶液为浓度2-2.5%的柠檬酸溶液或1mol/L的盐酸溶液。

7.根据权利要求1所述的一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法，其特征在于：步骤4）和步骤9）中所述离心的转速均为6500-7000r/min。

8.根据权利要求1所述的一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法，其特征在于：步骤5)所述大孔吸附树脂为HPD750大孔吸附树脂，其装柱量为罗汉果原料的1/10-1/9。

9.根据权利要求1所述的一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法，其特征在于：步骤7）所述D280大孔树脂的装柱量为罗汉果原料的1/40-1/38，步骤8）所述D392大孔树脂的装柱量为罗汉果原料的1/40-1/38。

10.根据权利要求1所述的一种提高罗汉果甜苷中罗汉果甜甙V纯度的方法，其特征在于：步骤10）所述灭菌是指温度134-138℃下灭菌30-35s，所述干燥为喷雾干燥。