[发明专利]一种利用融合表达提高酵母发酵生产葡萄糖二酸的方法在审
| 申请号： | 201510356992.6 | 申请日： | 2015-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN104911117A | 公开（公告）日： | 2015-09-16 |
| 发明（设计）人： | 康振;陈坚;堵国成;王淼;刘叶 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12P7/58;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 融合 表达 提高 酵母 发酵 生产 葡萄糖 方法 | ||
1.一种重组酵母菌，其特征在于，所述重组酵母菌融合表达肌醇加氧酶MIOX和醛酸脱氢酶Udh。
2.根据权利要求1所述的重组酵母菌，其特征在于，所述融合表达是将醛酸脱氢酶融合在肌醇加氧酶的N端；所述融合表达是直接融合表达或者使用连接肽进行融合表达。
3.根据权利要求1所述的重组酵母菌，其特征在于，所述连接肽为以下任意一种：GGGGS、GGGGSGGGGS、GGGGSGGGGSGGGGS、EAAAK、EAAAKEAAAK、EAAAKEAAAKEAAAK、PTPTP、PTPTPTPTP、PTPTPTPTPTPTPTP或SSSNNNNNNNNNN。
4.根据权利要求1所述的重组酵母菌，其特征在于，所述重组酵母菌的构建，是将GAP启动子、udh基因及miox基因按照顺序融合，然后连接到表达载体上，再转化到毕赤酵母、酿酒酵母或解脂假丝酵母中得到的。
5.根据权利要求1所述的重组酵母菌，其特征在于，所述肌醇加氧酶基因miox及醛酸脱氢酶基因udh为游离表达或者整合表达。
6.权利要求1-5任一所述重组酵母菌在发酵生产葡萄糖二酸方面的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述应用是以葡萄糖、甘油、蔗糖或者肌醇为底物催化合成葡萄糖二酸。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述是采用摇瓶发酵培养或者发酵罐发酵培养；采用摇瓶发酵培养时，将重组酵母菌种子液以5％-10％的接种量接种到发酵培养基中，25℃-30℃，180-220rpm培养24-96h；发酵罐发酵培养时，重组酵母菌种子液以5％-10％的接种量接种到发酵培养基中，25℃-30℃，600rpm-1000rpm，通气量1-4vvm，控制pH 5-6，培养24h—144h。
9.一种提高重组酵母菌发酵生产葡萄糖二酸的方法，其特征在于，所述方法是在酵母中融合表达肌醇加氧酶MIOX和醛酸脱氢酶Udh。
10.按权利要求6所述应用得到的葡萄糖二酸在食品、化工、制备药物方面的应用。
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