[发明专利]根据细胞尺寸来培养间充质干细胞的方法

权利要求书

1.一种培养间充质干细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)分离间充质干细胞，所述间充质干细胞的尺寸小于等于8μm；以及

(2)将所述间充质干细胞在含有3.3-3.8mM的钙和1.0-3.0mM的镁的培养基中进行培养，所述培养是在2-5％氧气的条件下进行。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述间充质干细胞来源于脐带血、骨髓、脂肪、肌肉、皮肤、羊水、脐带或牙齿。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述分离间充质干细胞是通过将所述间充质干细胞通过孔径为8μm的过滤膜而进行。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基选自Dulbecco改良eagle培养基(DMEM)、最小必需培养基(MEM)、α-MEM、McCoys5A培养基、eagle基础培养基、康诺特医学研究实验室(Connaught Medical Research Laboratory(CMRL))培养基、Glasgow MEM、Ham'sF-12培养基、Iscove改良Dulbecco培养基(IMDM)、Leibovitz'sL-15培养基、洛斯维帕克纪念研究所(RPMI)1640培养基、培养基199和Hank培养基199。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述培养基含有5-30％的胎牛血清。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述培养基不含胎牛血清，但含有血清替代物。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基在α-MEM的基础上补充有5-30％的胎牛血清、0.3-2.0mM的钙和0.2-2.2mM的镁。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，以与权利要求1相同的条件对所述间充质干细胞进行传代培养。

9.如权利要求1所述的方法获得的间充质干细胞。

10.一种包括如权利要求9所述的间充质干细胞的细胞治疗剂。

11.如权利要求10所述的细胞治疗剂，其特征在于，所述细胞治疗剂应用于脂肪细胞、骨细胞、肌细胞、神经细胞、心肌细胞、肝细胞、胰岛β细胞、血管细胞或肺细胞的再生或保护。

12.如权利要求10所述的细胞治疗剂，其特征在于，所述细胞治疗剂应用于选自以下情形中的一种：肺部疾病治疗；抑制或治疗肺病诱发的炎症；肺组织再生；以及抑制肺纤维化。

13.如权利要求10所述的细胞治疗剂，其特征在于，所述细胞治疗剂应用于软骨再生。

14.如权利要求10所述的细胞治疗剂，其特征在于，所述细胞治疗剂应用于治疗自身免疫疾病或移植物抗宿主疾病。

15.一种提高间充质干细胞的增殖能力和分化潜能的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)分离间充质干细胞，所述间充质干细胞的尺寸小于等于8μm；以及

(2)将所述间充质干细胞在含有3.3-3.8mM的钙和1.0-3.0mM的镁的培养基中进行培养，所述培养是在2-5％氧气的条件下进行。