[发明专利]一种提高蝉拟青霉液体发酵产物产量及产物活性的方法有效
申请号: | 201410263667.0 | 申请日: | 2014-06-13 |
公开(公告)号: | CN104046570A | 公开(公告)日: | 2014-09-17 |
发明(设计)人: | 贺亮;程俊文;韩素芳;韦朝阳;李卫旗;李海波;付立忠;魏海龙;胡传久 | 申请(专利权)人: | 浙江省林业科学研究院 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P19/04;C12R1/79 |
代理公司: | 浙江永鼎律师事务所 33233 | 代理人: | 郭小丽 |
地址: | 310023 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 青霉 液体 发酵 产物 产量 活性 方法 | ||
1.一种提高蝉拟青霉液体发酵产物产量及产物活性的方法,其特征在于,包括步骤:
(1)将由薏苡仁10-40重量份、黄芪10-40重量份、枸杞10-40重量份和白术10-40重量份组成的中药材经水溶液提取,得到中药复合水提液;
(2)将步骤(1)制备的中药复合水提液、白术内酯及吐温80加入发酵基础培养基中,得到蝉拟青霉发酵培养基;
(3)将蝉拟青霉菌种接入步骤(2)制得的蝉拟青霉发酵培养基中,经液体发酵,得到发酵液,然后分离得到发酵产物。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的中药复合水提液的制备方法包括:按所述量称取中药材,粉碎,加2倍-10倍水浸泡0.5h-1h,然后加热煎熬,保持温和的沸腾状态20min-60min,过滤收集提取液;重复提取1次-4次,合并滤液,得到中药复合水提液。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的蝉拟青霉发酵培养基每100ml中含有以生药材量计为1g-2g的中药复合水提液、0.2g-0.6g的白术内酯及0.1g-0.3g的吐温80。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的发酵基础培养基:葡萄糖2g/100ml、酵母粉0.4g/100ml、蛋白胨0.3g/100ml、KH2PO40.1g/100ml和MgSO40.05g/100ml。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的蝉拟青霉菌种的接入方法包括:将在PDA斜面培养基中活化后的蝉拟青霉菌种,接入灭菌后的液体种子培养基中培养,得到培养好的种子液,然后将培养好的种子液接入步骤(2)制得的蝉拟青霉发酵培养基中。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的蝉拟青霉菌种的接入方法包括:将在PDA斜面培养基中活化后的蝉拟青霉菌种,取5mm2-8mm2接入灭菌后的液体种子培养基中至100ml-200ml,20℃-30℃,100r/min-150r/min下摇床培养3天-5天,得到培养好的种子液,然后将培养好的种子液接入步骤(2)制得的蝉拟青霉发酵培养基中。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的蝉拟青霉菌种的菌种接种量为5%-15%。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的液体发酵条件:在温度20℃-30℃,转速60r/min-150r/min条件下,摇床培养5天-7天。
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