[发明专利]一种提高生物指示剂菌片指示菌回收率的方法有效

专利信息
申请号: 201410080507.2 申请日: 2014-03-06
公开(公告)号: CN103865848A 公开(公告)日: 2014-06-18
发明(设计)人: 朱以萍;张瑞丰;谢清;黄力勤;陆兵;吕京 申请(专利权)人: 中国科学院微生物研究所
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12R1/125
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅
地址: 100101 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 提高 生物 指示剂 指示菌 回收率 方法
【权利要求书】:

1.一种提高生物指示剂菌片指示菌回收率的方法,包括如下步骤:

(1)将生物指示剂菌片置于装有洗脱液的离心管中,并加入不锈钢珠,用组织破碎仪进行破碎处理,得到破碎后样品;

(2)将所述破碎后样品进行涡旋震荡,振荡后用所述洗脱液进行稀释,得到稀释后样品;

(3)将所述稀释后样品用100-400目细胞筛过滤,除去菌片碎屑,所得滤液为从所述生物指示剂菌片中获得的指示菌的菌悬液。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述进行破碎处理为于10-30Hz下震荡2-5min。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述生物指示剂菌片与所述洗脱液的配比为1片:(1-1.5ml)。

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述不锈钢珠的直径为所述离心管管口直径的25%-58%。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述进行涡旋震荡为于1000-2500rpm涡旋震荡1-3min。

6.根据权利要求1-5中任一所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,振荡后用所述洗脱液进行稀释,为用所述洗脱液进行5-20倍稀释。

7.根据权利要求1-6中任一所述的方法,其特征在于:所述洗脱液的溶剂为0.03mol/L磷酸盐缓冲液,溶质及浓度如下:硫代硫酸钠10g/L、吐温-801.0g/L、蛋白胨10g/L、氯化钠8.5g/L。

8.根据权利要求1-7中任一所述的方法,其特征在于:所述生物指示剂菌片的载菌介质为滤纸。

9.组织破碎仪在提高生物指示剂菌片指示菌回收率中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于:所述生物指示剂菌片的载菌介质为滤纸。

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