[发明专利]一种提高普鲁兰多糖产量的方法

权利要求书

1.一种提高普鲁兰多糖产量的方法，包括以下步骤：

(1)种子培养

将出芽短梗霉菌株进行活化后挑一环转接到500ml挡板瓶中，培养基装液量100ml，培养温度为32℃，摇床转速为180rpm，培养时间为28-32h；

(2)发酵培养

500mL挡板瓶瓶装液量100mL，接种量为4％(V/V)，温度28℃，摇床转速为400rpm，培养57-63h；

(3)普鲁兰多糖的分离

发酵液滤除菌体后，加入三倍乙醇，搅拌，4℃静置过夜，离心后，再使用无水乙醇冲洗2遍，干燥得白色普鲁兰多糖粗品；

其特征在于，菌体生长处于对数期初期时，加入0.03-0.05‰的维生素B₁，当菌体生长处于稳定期前期时，加入0.02-0.04‰的尿嘧啶核苷酸；

所述出芽短梗霉BCSWGHPL101（Aureobasidium pullulans）保藏编号为CGMCC NO.7055。

2.根据权利要求1所述提高普鲁兰多糖产量的方法，其特征在于，所述维生素B₁及尿嘧啶核苷酸经过0.45um无菌滤膜过滤。

3.根据权利要求1所述提高普鲁兰多糖产量的方法，其特征在于，所述种子培养，培养基组成为：蔗糖8g，酵母浸粉0.2g，氯化钠0.15g，磷酸氢二钾0.1g，硫酸铵0.1g，硫酸镁0.04g，硫酸亚铁0.05g，蒸馏水定容至100mL。

4.根据权利要求1所述提高普鲁兰多糖产量的方法，其特征在于，所述发酵培养，培养基组成为：蔗糖10g，蛋白胨0.4g，氯化钠0.3g，磷酸氢二钾0.7g，硫酸镁0.04g，硫酸亚铁0.05g，蒸馏水定容至100mL，初始pH5.5-6.5。

5.根据权利要求1所述提高普鲁兰多糖产量的方法，包括如下步骤：

(1)种子培养

将出芽短梗霉菌株进行活化后挑一环转接到500ml挡板瓶中，培养基装液量100ml，培养温度为32℃，摇床转速为180rpm，培养时间为28h；

(2)发酵培养

500mL挡板瓶装液量100mL，接种量为4％(V/V)，温度28℃，摇床转速为400rpm培养58h；菌体生长处于对数期初期时，加入0.03‰的维生素B₁，当菌体生长处于稳定期前期时，加入0.04‰的尿嘧啶核苷酸；

(3)普鲁兰多糖的分离

发酵液滤除菌体后，加入三倍乙醇，搅拌，4℃静置过夜，离心后，再使用无水乙醇冲洗2遍，干燥得白色普鲁兰多糖粗品76.3g/L。

6.根据权利要求1所述提高普鲁兰多糖产量的方法，包括如下步骤：

(1)种子培养

将出芽短梗霉菌株进行活化后挑一环转接到500ml挡板瓶中，培养基装液量100ml，培养温度为32℃，摇床转速为180rpm，培养时间为30h；

(2)发酵培养

500mL挡板瓶瓶装液量100mL，接种量为4％(V/V)，温度28℃，摇床转速为400rpm培养59h；菌体生长处于对数期初期时，加入0.04‰的维生素B₁，当菌体生长处于稳定期前期时，加入0.03‰的尿嘧啶核苷酸；

(3)普鲁兰多糖的分离

发酵液滤除菌体后，加入三倍乙醇，搅拌，4℃静置过夜，离心后，再使用无水乙醇冲洗2遍，干燥得白色普鲁兰多糖粗品76.4g/L。

7.根据权利要求1所述提高普鲁兰多糖产量的方法，包括如下步骤：

(1)种子培养

将出芽短梗霉菌株进行活化后挑一环转接到500ml挡板瓶中，培养基装液量100ml，培养温度为32℃，摇床转速为180rpm，培养时间为32h；

(2)发酵培养

500mL挡板瓶瓶装液量100mL，接种量为4％(V/V)，温度28℃，摇床转速为400rpm，培养61h；菌体生长处于对数期初期时，加入0.05‰的维生素B₁，当菌体生长处于稳定期前期时，加入0.02‰的尿嘧啶核苷酸；

(3)普鲁兰多糖的分离

发酵液滤除菌体后，加入三倍乙醇，搅拌，4℃静置过夜，离心后，再使用无水乙醇冲洗2遍，干燥得白色普鲁兰多糖粗品75.6g/L。

8.根据权利要求1-7任一所述提高普鲁兰多糖产量的方法在普鲁兰多糖生产中的应用。

9.根据权利要求1-7任一所述提高普鲁兰多糖产量的方法制备的普鲁兰多糖。