[发明专利]一种提高肝素钠收率的方法

说明书

技术领域

本法说明涉及一种提取提纯制备原料药的方法，属于化学领域，具体是一种制备高纯度高收率精品肝素钠。

背景技术

肝素钠是由猪或牛的肠粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属粘多糖类物质，在动物体内多以肝素钠-蛋白质复合物的形式存在。医学上，肝素钠在体内外均有抗凝血作用，可延长凝血时间、凝血酶原时间和凝血酶时间。临床上具有抗凝血、降血脂、保护内皮细胞、抗血小板积聚和释放、促纤溶、抑制动脉平滑肌细胞增殖、降低血液粘度和抗炎等作用。

我国是世界上最大的肝素钠原料药生产国，制备原料药肝素钠的方法主要有两种：生物酶法，化学裂解法。生物酶法主要以酶降解产生肝素钠，方法温和，但是成本很高，不适合批生产：另一种化学裂解法，产量多，但是过程中会影响肝素钠的活性，不适应药用。本工艺吸取了以上两种工艺的优点，多种萃取、提取和离子交换方法，方法温和，提取量相对较大，纯度较高，而且能够最大限度的去除肝素钠的杂质，比如多硫酸软骨素。

发明内容

本发明的目的为了改进现有技术的不足，而提供一种制备高纯度高收率肝素钠的工艺；该发明提供了一种简便的高纯度肝素钠制备技术，制得的肝素钠效价均高于180U/mg，高于中国药典要求的170U/mg，且依据中国药典肝素钠检测标准检测合格。

本发明的技术方案为：一种制备高纯度肝素钠的工艺，其步骤如下：

1、将粗品肝素钠溶入饮用水中，搅拌5-10小时，将其全部溶解；

2、将步骤1中溶解液，用盐酸溶液调PH至7.0-8.0，然后升温至50-55℃之间时加入胃蛋白酶，再加入胰酶，保温2-4小时；

3、将步骤2中酶解液在30～40分钟内升温至85-90℃，静止10-30分钟，搅拌，然后等降温至50-55℃时，用氢氧化钠溶液调PH至10.0-12.0，静止20-30小时，分层，虹吸上清，过滤，留上清液待沉淀，下层沉淀放离心机离心，离心后留上层离心液；

4、待步骤3中上清液和离心液温度降至20-30℃，加入氯化钠，搅拌溶解，用盐酸调PH至10.0-12.0，边搅边加浓度为75-80％乙醇溶液，沉淀10-12小时；

5、取步骤4中下层沉淀物用纯化水溶解，用氢氧化钠溶液将溶液调PH至10.0-12.0，然后加入双氧水氧化10-12小时；

6、将步骤5中溶液加入氯化钠，搅拌溶解后，用盐酸溶液将溶液调PH至6.0-7.0，加入乙醇溶液，沉淀10-12小时；

7、取步骤6中下层沉淀物用纯化水溶解，用氢氧化钠溶液调PH至10.0-12.0，然后加入体积3-5％双氧水，氧化10-12小时；

8、将步骤7中溶液加入氯化钠，用盐酸溶液调PH至10.0-12.0，边搅边加浓度为95～97％的乙醇溶液，沉淀10-12小时；

9、取步骤8中下层沉淀物用纯化水溶解，用氢氧化钠溶液调PH至10.0-12.0，然后加入双氧水，氧化10-12小时；

10、将步骤9中溶液加入氯化钠，用盐酸溶液调PH至6.0-7.0，然后冷冻至-10℃--5℃，边搅边加丙酮，在-5℃-0℃中保温24-30小时，弃去上清液，多硫酸软骨素被丙酮带走，用纯化水将沉淀物溶解，加入氯化钠，用盐酸溶液调PH至6.0-7.0，边搅边加乙醇，沉淀10-12小时；

11、将步骤10中沉淀物用纯化水溶解后，用微米滤膜板框机微滤，用乙醇沉淀，再加入氯化钠溶液，静止沉淀10-12小时，取沉淀物，用乙醇溶解，静置24-30小时；弃去上层液，将不锈钢砂芯棒放在产品中，用真空泵通抽干；

12、将步骤11中产品放在真空干燥箱中，烘干70-80小时，得产品。

有益效果：

1、本发明结合升温氧化结合多种物理提取方法并纯化得到效价高于180U/mg，收率高于80％的高纯度肝素钠。

2、通过升温补加双氧水可以有效的控制肝素钠氧化失活，并且实现了氧化与脱色同步进行。

3、依据肝素钠及其结构类似物的极性差异，在氯化钠溶液中用丙酮萃取，在用乙醇沉淀洗脱，最后得到肝素钠产品。工艺采用的丙酮萃取法，使得多硫酸软骨素杂质被萃取，而肝素钠产品留在了低盐溶液中，用乙醇沉淀，极大地提高了收率，最终得到的肝素钠产品达到中国药典标准，并且经测不含多硫酸软骨素成分。

具体实施方式

实施例1

(1)将50g粗品肝素钠溶入饮用水中，搅拌5小时，将其全部溶解；

(2)用盐酸溶液调PH至7.0，然后升温至50℃之间时加入5g/亿单位胃蛋白酶，再加入10g/亿单位胰酶，保温2小时；