[发明专利]一种提高免疫力的马齿苋多糖脂质体的制备及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及脂质体制备方法技术领域,具体的，本发明涉及一种提高免疫力的马齿苋多糖脂质体的制备及其应用的技术领域。

背景技术

马齿苋（Portulaca oleracea L.）属马齿苋科一年生肉质草本植物，在我国大部分地区均有分布。马齿苋含有多种对人体有益的营养成分和药用成分，其性寒、味酸，富合不饱和脂肪酸、维生素C、E和胡萝卜素，是我国卫生部规定的78种药食同源野生植物之一。以及苹果酸、谷氨酸和天门冬氨酸、草酸等，钙、磷、铁、及锌、铜等含量也较高。另外，还含有较多的钾元素，其中有硝酸钾、硫酸钾、草酸氢钾等多种钾盐。有抗菌消炎、降血脂、抗动脉粥样硬化、增强免疫力、抗衰老等作用，具有清热解毒、祛湿止带功效，适用于湿热下注、带下色黄、黏稠味臭、小便短黄、口渴口苦、舌红苔黄、脉滑者，亦可用于湿热泄泻、痢疾等。能驱虫功效，适用于小儿钩虫病。并具有清热解毒、止泻痢、除肠垢、益气补虚功效，适用于治疗久痢。是一种保健价值很高的草本植物。而马齿苋多糖是马齿苋主要活性成分之一，不仅具有增强免疫调节、抗肿瘤、降血糖、抗病毒、抗菌、抗氧化等功能，还具有抗衰老、抗凝血、降血脂、抗突变、抗辐射等作用。随着对马齿苋多糖药理作用的研究，对马齿苋多糖的开发和利用越来越受到人们的广泛关注。

现有技术表明，经分离提纯后的天然马齿苋多糖目前面临着三个方面的问题，一是稳定性差，易受光照、温度、氧、pH等影响，易氧化分解；二是溶解性低；三是生物利用度低，由于其稳定性差和溶解性低，从而降低了其生物活性，使其应用受限。亟需加以解决天然马齿苋多糖目前所面临的问题，如何利用高效载体来包裹马齿苋多糖，使其不受外界因素的影响，提高其稳定性和消化率，防止其生物活性降解，提高生物利用度，具有重要的现实意义。

发明内容

针对国内外报道未有解决有关分离提纯后的天然马齿苋多糖目前面临的问题，未有关于马齿苋多糖有效载体的研究现状。本发明提供一种提高免疫力的马齿苋多糖脂质体的制备及其应用，获得马齿苋多糖脂质体制备的最佳工艺条件，制备的马齿苋多糖脂质体具有很好的缓释效果，表现出更高的消化率、活性稳定性和免疫活性，且对双歧杆菌有显著增殖作用，其生物利用度和稳定性显著提高，对于马齿苋多糖产业化应用具有重要的现实意义。

本发明采用的主要技术方案：

通过提供一种提高免疫力的马齿苋多糖脂质体的最佳制备方法，选用制备的脂质体作为多糖的载体，利用其靶向性和淋巴定向性、缓释性、细胞亲和性与组织相容性、降低药物毒性、保护药物提高稳定性等特点，延缓药物在体内的释放，从而降低药物的毒性，提高生物利用度。本发明以包封率为考察指标，优化制备马齿苋多糖脂质体的工艺，并从稳定性、缓释效果、生物利用度三个方面对马齿苋多糖脂质体进行性能评价，为马齿苋多糖产业化应用提供现实的科学依据。

本发明具体提供了一种提高免疫力的马齿苋多糖脂质体的制备方法，具体制备方法步骤如下。

（1）选用主料为马齿苋多糖，是将马齿苋经分离提纯后的纯度为84.31%的马齿苋多糖，需在4℃下储存备用，辅料为卵磷脂和胆固醇、维生素C，选用卵磷脂和胆固醇作为壁材，脂药比按照卵磷脂与马齿苋多糖重量比计为2.5：1，壁材比按照卵磷脂与胆固醇重量比计为1.8：1，选用浓度为80%的乙醇作为油相的溶剂，马齿苋多糖、卵磷脂与胆固醇作为油相的溶质，其中，纯度为84.31%的马齿苋多糖的浓度为0.016g/ml，卵磷脂的浓度为0.04g/ml，胆固醇的浓度为0.022g/ml，维生素C的浓度为0.022g/ml。

（2）油相的制备：将上述步骤制备的马齿苋多糖、卵磷脂、胆固醇、维生素C溶解于上述步骤选用的浓度80%的乙醇中，在50～55℃水浴条件下至完全溶解。

（3）水相的制备：油相与水相之比按照体积比计比例为2:1；水相由冷冻保护剂、乳化剂、乳化剂和溶剂组成，其中，冷冻保护剂采用甘露醇，乳化剂采用Tween20，溶剂采用蒸馏水，添加甘露醇的含量为水相总量的5%，添加Tween20的含量为水相总量的5%，添加蒸馏水的含量为水相总量的90%，将甘露醇、Tween20加入蒸馏水混匀至溶解。

（4）将步骤（2）制备的油相用注射器快速注入步骤（3）制备的水相中。

（5）将上述步骤（4）制备的马齿苋多糖脂质体溶液采取磁力搅拌，磁力搅拌速度40 r/min，搅拌5min，使其混合均匀。

（6）旋转蒸发：在55℃温度下经旋转蒸发器减压蒸发，确保乙醇完全蒸完。