[发明专利]白细胞的分类计数方法、白细胞分类试剂盒及白细胞分类试剂有效
申请号: | 201280016125.2 | 申请日: | 2012-04-18 |
公开(公告)号: | CN103460041A | 公开(公告)日: | 2013-12-18 |
发明(设计)人: | 大塚佐绪里;八町和树;水上利洋;小国振一郎 | 申请(专利权)人: | 希森美康株式会社 |
主分类号: | G01N33/49 | 分类号: | G01N33/49;G01N15/14;G01N21/49;G01N21/64;C12Q1/02 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 罗菊华 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 白细胞 分类 计数 方法 试剂盒 试剂 | ||
1.白细胞的分类计数方法,其包括:
将活体样品,染色核酸的第1试剂,用于使红细胞溶血,给白细胞的细胞膜造成能透过上述荧光染料的程度的损伤的阳离子性表面活性剂及非离子性表面活性剂,以及含有20mM以上50mM以下的浓度的芳香族的有机酸的第2试剂混合而制备测定样品的步骤;
向制备的测定样品照射光,取得这时发生的散射光信息及荧光信息的步骤;及
基于取得到的散射光信息及荧光信息,将上述活体样品中的白细胞分类,同时区别检测母细胞和非典型淋巴细胞的步骤;
其中,
当上述第2试剂中的芳香族的有机酸的浓度是20mM以上、不足30mM时,上述第2试剂的pH是5.5以上6.4以下,
当上述第2试剂中的芳香族的有机酸的浓度是30mM以上50mM以下时,上述第2试剂的pH是5.5以上7.0以下。
2.权利要求1所述的方法,其中上述芳香族的有机酸是选自下列的至少一种:芳香族羧酸、芳香族磺酸及它们的盐。
3.权利要求1或2所述的方法,其中上述第2试剂中的芳香族的有机酸的浓度是40mM以上50mM以下。
4.权利要求1或2所述的方法,其中上述第2试剂中的pH是5.5以上6.2以下。
5.权利要求1或2所述的方法,其中上述散射光信息是侧方散射光信息。
6.权利要求1或2所述的方法,其中上述阳离子性表面活性剂是季铵盐型表面活性剂、或者吡啶鎓盐型表面活性剂。
7.权利要求1或2所述的方法,其中上述非离子性表面活性剂是以下的通式(VI)所表示的聚氧乙烯系统非离子表面活性剂:
R1-R2-(CH2CH2O)n-H(VI)
式中,
R1是碳原子数8~25的烷基、烯基或炔基;
R2是氧原子、-COO-或
n是10~50的整数。
8.白细胞分类试剂盒,其含:
含有能染色核酸的荧光染料的第1试剂,
用于使红细胞溶血,给白细胞的细胞膜造成能透过上述荧光染料的程度的损伤的阳离子性表面活性剂及非离子性表面活性剂,以及
含有20mM以上50mM以下的浓度的芳香族的有机酸的第2试剂,
其中,
当上述第2试剂中的芳香族的有机酸的浓度是20mM以上、不足30mM时,上述第2试剂的pH是5.5以上6.4以下,
当上述第2试剂中的芳香族的有机酸的浓度是30mM以上50mM以下时,上述第2试剂的pH是5.5以上7.0以下。
9.权利要求8所述的试剂盒,其中上述芳香族的有机酸是选自下列的至少一种:芳香族羧酸、芳香族磺酸及它们的盐。
10.权利要求8或9所述的试剂盒,其中上述第2试剂中的芳香族的有机酸的浓度是40mM以上50mM以下。
11.权利要求8或9所述的试剂盒,其中上述第2试剂中的pH是5.5以上6.2以下。
12.权利要求8或9所述的试剂盒,其中上述阳离子性表面活性剂是季铵盐型表面活性剂、或者吡啶鎓盐型表面活性剂。
13.权利要求8或9所述的试剂盒,其中上述非离子性表面活性剂是以下的通式(VI)所表示的聚氧乙烯系统非离子表面活性剂:
R1-R2-(CH2CH2O)n-H(VI)
式中,
R1是碳原子数8~25的烷基、烯基或炔基;
R2是氧原子、-COO-或
n是10~50的整数。
14.白细胞分类试剂,其特征在于,其是含能染色核酸的荧光染料,阳离子性表面活性剂,非离子性表面活性剂,和芳香族的有机酸的白细胞分类试剂,
上述试剂中含的芳香族的有机酸的浓度是20mM以上50mM以下,
当上述芳香族的有机酸的浓度是20mM以上、不足30mM时,pH是5.5以上6.4以下,
当上述芳香族的有机酸的浓度是30mM以上50mM以下时,pH是5.5以上7.0以下。
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