[发明专利]提高假单胞菌生产D-甘露糖异构酶产量的方法无效
申请号: | 200810235891.3 | 申请日: | 2008-11-10 |
公开(公告)号: | CN101519640A | 公开(公告)日: | 2009-09-02 |
发明(设计)人: | 童群义;张荆 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N9/90;C12R1/38 |
代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所 | 代理人: | 时旭丹;刘品超 |
地址: | 214125江苏省无锡市滨*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 提高 假单胞菌 生产 甘露 糖异构酶 产量 方法 | ||
1.一株产D-甘露糖异构酶的菌株JN18,其分类命名为假单胞菌(Pseudomonas sp.),已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.2120。
2.一种优化发酵培养基提高假单胞菌CGMCC No.2120生产D-甘露糖异构酶产量的方法,其特征在于:
菌种:假单胞菌CGMCC No.2120;
优化后的产酶发酵培养基以g/L计为:果糖15-16,牛肉膏20,酵母膏2,K2HPO4 2,MgSO4·7H2O 0.5,NaCl 0.5,Tween-80 1.5-1.6;
发酵培养:吸取种子发酵液至装有发酵培养基的250mL三角瓶中,接种量为4%体积分数,30℃振荡培养48h;
粗酶液的制备:发酵液4℃、10000r/min离心10min,弃去上清液,向沉淀中加入pH7.0、0.05mol/L磷酸盐缓冲液,洗涤2次,再用原发酵液4倍体积的磷酸盐缓冲液悬浮,然后在冰浴条件下进行400W、5min超声波破碎,4℃、15000r/min离心15min,上清液即为粗酶液。
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